导读:本文包含了精子获得论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:法医遗传学,单细胞分析,精子细胞,随机模拟法
精子获得论文文献综述
吴秋昀,章俊,彭苗苗,何康,周密[1]（2019）在《单细胞分析精子获得完整分型概率的理论研究》一文中研究指出目的推导单细胞分析精子获得完整分型概率(CP)公式,并以随机模拟法进行验证。方法首先根据定义推导CP的数学公式,在15个基因座上计算CP的公式值。其次以随机模拟法设计实验,在15个基因座上计算CP的模拟值。最后,以模拟值对比公式值的方式,对公式进行实验验证。结果 CP公式符合模拟实验验证。在同一系统中,CP与精子数(M)成正相关。当M相同时,CP与常染色体基因座数成负相关。Identifiler系统检测15个精子获得完整分型的概率超过99.9%,检测18个精子获得完整分型的概率超过99.99%。结论本文结果对于单细胞分析精子的实践应用具有一定的指导意义。(本文来源于《中国法医学杂志》期刊2019年02期）
汪妹[2]（2017）在《生殖细胞体外减数分裂获得功能精子细胞》一文中研究指出近年来,根据世界卫生组织(WHO)的统计,不孕不育症已困扰着全球约15%的育龄夫妇,其中,由于男性因素导致的不育约占到不孕不育总数的一半。对不孕不育症,目前仅能通过辅助生殖技术来进行治疗,但包括人工体外受精(In vitro fertilization,IVF)、卵胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)在内的辅助生殖技术都要求夫妻双方提供健康的配子。而对于功能精子缺乏导致的男性不育患者,由于没有成熟的雄性配子而只能接受精子库的供精,因而仍无法得到真正意义上的自己的后代。因此,通过细胞培养与组织培养的方法将具有多向分化潜能的胚胎干细胞或睾丸组织在体外经过生殖细胞分化和减数分裂来获得功能的雄性配子能为无精症患者提供新的希望。本研究中,我们围绕如何在体外环境通过人工培养获得功能精子展开论述。本文主要利用小鼠胚胎干细胞和新生小鼠睾丸组织运用细胞工程与组织工程的手段使得具有分化潜能的细胞和组织完全在体外培养的环境中完成减数分裂,并最终产生具有受精能力的功能精子。具体来说,本文主要进行了以下几方面的研究。1、小鼠胚胎干细胞体外减数分裂获得单倍体精子样细胞的发育功能研究。我们首先利用体外定向分化胚胎干细胞为原始生殖细胞样细胞分化技术,模拟体内胚胎期生殖细胞发育过程,将小鼠ESCs首先分化成上胚层样细胞(Epiblast Like Cells,EpiLCs),再使EpiLCs在骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)等PGCs诱导的关键因子的作用下分化为(Primordial germ cell like cells,PGCLCs)。随后,通过PGCs特异表达的Blimp1-mVenus和Stella-ECFP报告基因系统或PGC特异的表面标志物SSEA1和Intergrin-β3进行PGCLCs的纯化富集。此后,我们利用新生的唯支持细胞综合征小鼠的睾丸细胞与分选得到的PGCLCs混合培养,在多种细胞因子与激素的共同作用下,PGCLCs能体外环境中启动并完成减数分裂。最终,我们能利用流式细胞分选技术在培养两周的PGCLCs与无精症小鼠睾丸细胞的混合细胞中分选出单倍体细胞。这些单倍体细胞直径约8~9μm,小而圆且存在明显集中的染色质区域;免疫荧光染色的结果显示这些单倍体细胞表达生殖细胞标志分子DDX4且通过PNA的作用显示精子特异的顶体颗粒或顶体帽的存在;父源印记基因H19的甲基化模式建立完全,母源印记基因Snrpn几乎处于完全开放的状态,说明其表观遗传特征已经建立;我们收集这些单倍体细胞进行表达谱分析发现这些细胞在聚类分析上与体内来源的圆形精子细胞最为接近。由于我们得到的经过体外减数分裂而来的单倍体细胞在多方面的特征上都与睾丸曲细精管中的圆形精子细胞非常类似,因此将其命名为精子细胞样细胞(Spermatid like cells,SLCs)。随后,我们对流式分选而来的SLCs进行了圆形精子细胞卵浆注射(Round spermatid injection,ROSI)以验证其发育潜能同时这也是配子功能的“黄金标准”。在两个不同背景的胚胎干细胞系分化而来的SLCs中,我们共注射379枚卵母细胞,最终通过移植到假孕母鼠体内得到9只健康出生且可育的子代小鼠。至此,本研究首次实现了完全利用体外培养条件将小鼠多能性干细胞经过减数分裂分化为有功能的雄性配子,为干细胞分化技术治疗男性不育症提供了新的治疗思路和良好的研究基础。我们相信,经过科学家们的不断努力,这一技术在其他物种或人类中的应用终将为未来的不育症患者带来福音。2、高效地获得小鼠睾丸组织体外培养来源的功能配子我们将新生小鼠睾丸曲细精管在体外利用琼脂块作为支撑,在气液结合的培养条件下进行培养,进而通过添加此前报道能够促进减数分裂与精子发生的细胞因子和激素共同培养,从而来筛选在组织培养条件下对体外减数分裂和精子发生起到促进作用的因子。在七种添加的因子中,通过对曲细精管中单倍体含量进行检测,我们筛选到睾酮(Testosterone,T)和垂体提取物(Bovin pituitary extract,BPE)对单倍体生成的促进作用较其他组别更加明显。在后续更加细化的时间点监测中,我们发现BPE能够在更早且更高效率的促成曲细精管的体外精子发生。在此条件下,BPE添加组能够获得约12%的单倍体比例,且这些单倍体细胞在形态上具有圆形精子细胞典型的直径大小、染色质分布特征。随后,为了验证通过这种组织培养得到的单倍体细胞是否具有正常的配子发育潜能,我们对其经流式分选富集后进行ROSI。对照组与BPE组分别注射66与44枚卵母细胞后,分别有90.9%和95.5%的胚胎能发育到2-细胞时期,将这2-细胞移植到假孕母鼠输卵管后,我们在两组中各得到2只健康出生的子代小鼠。在本研究中,我们首次发现垂体提取物对体外睾丸组织培养的精子发生具有重要的促进作用,垂体提取物的添加显着提高了体外曲细精管培养获得功能精子细胞的效率。由于组织培养较传统的二维细胞培养能更好的保留细胞间的信号转导以及相互作用,因此,睾丸组织培养能更真实的模拟体内减数分裂的发生和精子形成的过程。借助这一培养体系,我们对精子发生过程进行更深入的研究为此系统从小鼠延伸到人类睾丸组织培养的应用提供了更多参考价值。综上所述,本研究为人工精子的获得提供了新的研究思路,并为男性不育症的临床治疗提供了理论研究基础。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2017-05-01）
樊国达,张晗,王莹,王晓芳,穆淑梅[3]（2017）在《副性腺蛋白消化法和匀浆法获得中华绒螯蟹游离精子比较研究》一文中研究指出为了获得中华绒螯蟹形态良好及最佳生理状态的游离精子,采用副性腺蛋白消化法和机械匀浆法获取中华绒螯蟹精子,比较两种方法所得精子的密度和成活率,并用80μg/mL的钙载体A23187对所得精子进行诱导,比较两种方法所得精子诱导后的顶体反应率,以及精子顶体反应各时期的比例。结果显示:副性腺蛋白消化法获得的精子密度为(1.83±0.87)×108/mL,成活率为(99.37±0.11)%,均显着高于机械匀浆法(P<0.05)。室温诱导30min后,副性腺蛋白消化法所得精子的顶体反应率为(51.77±31.18)%,是自发顶体率的2.97倍。匀浆法所得精子的顶体反应率为(74.54±13.84)%,与自发顶体率相比无显着差异(P>0.05)。此外,由于匀浆法对精子膜的损伤,其所得精子中发生顶体反应的精子多处于第III时期,比例为(70.41±25.81)%,能够进入第IV时期的比例仅为(21.16±22.45)%,而副性腺蛋白消化法所得精子中发生顶体反应的精子多处于第IV时期,比例为(69.09±9.29)%。表明,通过副性腺蛋白消化法获得中华绒螯蟹精子的方法显着优于机械匀浆法。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2017年01期）
周璇,史潇,全松[4]（2016）在《精子非编码小RNA介导获得性状跨代遗传的研究进展》一文中研究指出人类精子RNA的存在已被证实,其在改变早期胚胎事件中发挥着重要作用。近年来的研究表明,父代饮食结构、应激状态等环境暴露因素可以改变非编码小RNA表达水平,从而作为父代遗传信息传递的携带者及表观遗传的标记物,改变早期胚胎发育和子代生长状况,介导获得性状的跨代遗传,这从非编码小RNA的角度,为精子表观遗传学研究提供了新的靶点。在众多研究中,精子piRNA、microRNA、tRNA的研究成果尤为显着,其广泛存在于雄性生殖细胞中,可通过相应的调控机制,介导获得性状的跨代遗传。本文将着重阐述上述3种非编码小RNA在精子表观遗传学研究中所取得的进展,为男性生殖医学研究提供新的视野。(本文来源于《中华男科学杂志》期刊2016年11期）
王垚[5]（2016）在《法国人造精子获得专利:卵细胞买账吗?》一文中研究指出2015年09月25日新浪科技培养皿真的能培育精子吗?早在这项技术公诸于众之前,就已经有法国的研究人员这么做了,他们为此项技术申请了专利,尽管研发细节和同业审查结果还尚未公布。法国里昂Kallistem生物技术公司的菲利普·杜兰德和玛丽海伦·皮拉德声称,他们的方法是实验中诱导人体、大鼠或是猴子的曲细精管产生成熟的精细胞。来自日本的研究团队早在2011年就成功地在实验室造出了小鼠精细胞,但(本文来源于《《科学与现代化》2016年第1期（总第066期）》期刊2016-03-01）
余伟,吴志强,贾文俊[6]（2015）在《精子“获能”获得的是什么能?》一文中研究指出1疑问吴志强精子在体外受精时,要有一个准备阶段,包括精子的获能过程,此处的"能"是指能量还是指一种特殊的能力呢?毫无疑问,精子获能是具备一种能力的过程。那么在这个过程中,有没有获得能量呢?侯建林[河南省唐河县友兰实验高中(473400)]获能的"能"是一种"能力",即精子表面发生的生理变化,使精子能够和卵子完成受精的能力,并非"能量"。如果是指"能量",试问生殖道内和体外的获(本文来源于《中学生物教学》期刊2015年Z1期）
蒋凌英,杨凌云,骆晔,郑琼,韩飞[7]（2014）在《有顶体精子是部分圆头精子症患者获得满意ICSI受精率的前提》一文中研究指出目的探讨部分圆头精子症患者获得满意ICSI受精率的前提条件。方法收集在我院行卵细胞浆内单精子注射治疗的26例部分圆头精子症和5例100%圆头精子症,根据精子染色标本中是否有正常形态精子将其分为两组,组Ⅰ(12例,正常形态率大于0%);组Ⅱ(14例,正常形态率0%)。5例100%圆头精子症设为组Ⅲ,来自自愿捐赠者IVF后未受精的20颗卵子设为组Ⅳ,挑选20颗圆头精子对其行ICSI,将2013年12月于我院行ICSI治疗的52例患者作为对照组。比较五组的ICSI受精率和优胚率。结果组Ⅰ,组Ⅱ与对照组之间ICSI受精率及优胚率均无显着差异(P>0.05)。组Ⅰ,组Ⅱ与对照组的ICSI受精率显着高于组Ⅲ和组Ⅳ(P<0.01),但组Ⅲ和组Ⅳ之间ICSI受精率无显着差异(P>0.05)。结论应避免将圆头精子用于ICSI;有顶体精子是部分圆头精子症患者获得满意ICSI受精率的前提(本文来源于《2014浙江省妇产科学、围产医学学术年会暨妇产科常见疾病规范化治疗新进展、围产医学现状与进展专题学术论坛论文汇编》期刊2014-06-27）
刘莉,何湃,采克俊,张易祥,曹访[8]（2013）在《MxA基因修饰的鸡精原干细胞体内移植获得转基因精子》一文中研究指出本实验旨在探讨鸡精原干细胞(SSCs)经体外遗传修饰后移植获得转基因精子的方法。将人抗病毒基因MxA重组慢病毒体外感染鸡SSCs,获得可表达MxA的SSCs;同时将80日龄公鸡经白消安处理30 d后作为无生精能力的受体鸡。MxA基因转染后的SSCs移植到受体鸡,10 d后开始采精,经PCR检测精液DNA中的MxA基因;取移植后10 d的睾丸组织分离培养并检测外源基因表达。结果表明:MxA重组慢病毒感染SSCs后,可见其特征性荧光表达;白消安处理后的受体鸡睾丸组织曲细精管中内源性生精细胞已基本去除;实验组有1只受体鸡的精液DNA连续4次扩增出MxA特异性片段;睾丸组织细胞的RT-PCR及免疫组化均检测到MxA基因的表达。结果显示,重组慢病毒感染后的SSCs能成功移植至受体组织,并继续分化为携带MxA外源基因的精子。本研究为下一步通过人工授精获得抗病毒转基因鸡奠定了良好基础。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2013年19期）
吴斌,戴建军,张廷宇,张树山,吴彩凤[9]（2013）在《精子载体法获得植酸酶转基因猪》一文中研究指出将带有植酸酶基因的重构质粒酶切纯化后,与去除精浆的猪新鲜精液按比例混合,17℃孵育处理使重构质粒结合到精子头部,通过人工授精对6头受体母猪进行配种,4头受孕,产仔38头。经PcR对特异性片段扩增,结果表明:有6头PcR结果为阳性,阳性率为15.8%。扩增片段经克隆、测序、比对,与阳性对照组序列相似率均在99%以上,说明目的基因已转入阳性个体体内。(本文来源于《上海农业学报》期刊2013年05期）
周桦,何峻,周从容[10]（2012）在《MI期未成熟卵胞浆内单精子注射后可获得胚胎分析》一文中研究指出目的:探讨来源于超排卵刺激周期的MI期未成熟卵胞浆内单精子注射(ICSI)后受精和发育能力。方法:选择ICSI治疗中无第一极体也无生发泡的MI期卵母细胞共37枚,行常规ICSI授精,16～18 h后观察受精情况,以后每24 h观察胚胎生长情况并评级,直至采卵后72 h,按ICSI时MII卵子受精数计算受精率。结果:ICSI 37枚卵子,观察到原核的受精卵7枚,共获得11枚胚胎(4细胞I级,5～8细胞I级或II级胚胎9枚),受精率为29.73%(11/37)。结论:MI期卵子ICSI后仍有受精和胚胎出现,该部分胚胎是患者能多获得的可移植胚胎。(本文来源于《贵阳医学院学报》期刊2012年06期）
精子获得论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
近年来,根据世界卫生组织(WHO)的统计,不孕不育症已困扰着全球约15%的育龄夫妇,其中,由于男性因素导致的不育约占到不孕不育总数的一半。对不孕不育症,目前仅能通过辅助生殖技术来进行治疗,但包括人工体外受精(In vitro fertilization,IVF)、卵胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)在内的辅助生殖技术都要求夫妻双方提供健康的配子。而对于功能精子缺乏导致的男性不育患者,由于没有成熟的雄性配子而只能接受精子库的供精,因而仍无法得到真正意义上的自己的后代。因此,通过细胞培养与组织培养的方法将具有多向分化潜能的胚胎干细胞或睾丸组织在体外经过生殖细胞分化和减数分裂来获得功能的雄性配子能为无精症患者提供新的希望。本研究中,我们围绕如何在体外环境通过人工培养获得功能精子展开论述。本文主要利用小鼠胚胎干细胞和新生小鼠睾丸组织运用细胞工程与组织工程的手段使得具有分化潜能的细胞和组织完全在体外培养的环境中完成减数分裂,并最终产生具有受精能力的功能精子。具体来说,本文主要进行了以下几方面的研究。1、小鼠胚胎干细胞体外减数分裂获得单倍体精子样细胞的发育功能研究。我们首先利用体外定向分化胚胎干细胞为原始生殖细胞样细胞分化技术,模拟体内胚胎期生殖细胞发育过程,将小鼠ESCs首先分化成上胚层样细胞(Epiblast Like Cells,EpiLCs),再使EpiLCs在骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)等PGCs诱导的关键因子的作用下分化为(Primordial germ cell like cells,PGCLCs)。随后,通过PGCs特异表达的Blimp1-mVenus和Stella-ECFP报告基因系统或PGC特异的表面标志物SSEA1和Intergrin-β3进行PGCLCs的纯化富集。此后,我们利用新生的唯支持细胞综合征小鼠的睾丸细胞与分选得到的PGCLCs混合培养,在多种细胞因子与激素的共同作用下,PGCLCs能体外环境中启动并完成减数分裂。最终,我们能利用流式细胞分选技术在培养两周的PGCLCs与无精症小鼠睾丸细胞的混合细胞中分选出单倍体细胞。这些单倍体细胞直径约8~9μm,小而圆且存在明显集中的染色质区域;免疫荧光染色的结果显示这些单倍体细胞表达生殖细胞标志分子DDX4且通过PNA的作用显示精子特异的顶体颗粒或顶体帽的存在;父源印记基因H19的甲基化模式建立完全,母源印记基因Snrpn几乎处于完全开放的状态,说明其表观遗传特征已经建立;我们收集这些单倍体细胞进行表达谱分析发现这些细胞在聚类分析上与体内来源的圆形精子细胞最为接近。由于我们得到的经过体外减数分裂而来的单倍体细胞在多方面的特征上都与睾丸曲细精管中的圆形精子细胞非常类似,因此将其命名为精子细胞样细胞(Spermatid like cells,SLCs)。随后,我们对流式分选而来的SLCs进行了圆形精子细胞卵浆注射(Round spermatid injection,ROSI)以验证其发育潜能同时这也是配子功能的“黄金标准”。在两个不同背景的胚胎干细胞系分化而来的SLCs中,我们共注射379枚卵母细胞,最终通过移植到假孕母鼠体内得到9只健康出生且可育的子代小鼠。至此,本研究首次实现了完全利用体外培养条件将小鼠多能性干细胞经过减数分裂分化为有功能的雄性配子,为干细胞分化技术治疗男性不育症提供了新的治疗思路和良好的研究基础。我们相信,经过科学家们的不断努力,这一技术在其他物种或人类中的应用终将为未来的不育症患者带来福音。2、高效地获得小鼠睾丸组织体外培养来源的功能配子我们将新生小鼠睾丸曲细精管在体外利用琼脂块作为支撑,在气液结合的培养条件下进行培养,进而通过添加此前报道能够促进减数分裂与精子发生的细胞因子和激素共同培养,从而来筛选在组织培养条件下对体外减数分裂和精子发生起到促进作用的因子。在七种添加的因子中,通过对曲细精管中单倍体含量进行检测,我们筛选到睾酮(Testosterone,T)和垂体提取物(Bovin pituitary extract,BPE)对单倍体生成的促进作用较其他组别更加明显。在后续更加细化的时间点监测中,我们发现BPE能够在更早且更高效率的促成曲细精管的体外精子发生。在此条件下,BPE添加组能够获得约12%的单倍体比例,且这些单倍体细胞在形态上具有圆形精子细胞典型的直径大小、染色质分布特征。随后,为了验证通过这种组织培养得到的单倍体细胞是否具有正常的配子发育潜能,我们对其经流式分选富集后进行ROSI。对照组与BPE组分别注射66与44枚卵母细胞后,分别有90.9%和95.5%的胚胎能发育到2-细胞时期,将这2-细胞移植到假孕母鼠输卵管后,我们在两组中各得到2只健康出生的子代小鼠。在本研究中,我们首次发现垂体提取物对体外睾丸组织培养的精子发生具有重要的促进作用,垂体提取物的添加显着提高了体外曲细精管培养获得功能精子细胞的效率。由于组织培养较传统的二维细胞培养能更好的保留细胞间的信号转导以及相互作用,因此,睾丸组织培养能更真实的模拟体内减数分裂的发生和精子形成的过程。借助这一培养体系,我们对精子发生过程进行更深入的研究为此系统从小鼠延伸到人类睾丸组织培养的应用提供了更多参考价值。综上所述,本研究为人工精子的获得提供了新的研究思路,并为男性不育症的临床治疗提供了理论研究基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
精子获得论文参考文献
[1].吴秋昀,章俊,彭苗苗,何康,周密.单细胞分析精子获得完整分型概率的理论研究[J].中国法医学杂志.2019
[2].汪妹.生殖细胞体外减数分裂获得功能精子细胞[D].湖南师范大学.2017
[3].樊国达,张晗,王莹,王晓芳,穆淑梅.副性腺蛋白消化法和匀浆法获得中华绒螯蟹游离精子比较研究[J].河北农业大学学报.2017
[4].周璇,史潇,全松.精子非编码小RNA介导获得性状跨代遗传的研究进展[J].中华男科学杂志.2016
[5].王垚.法国人造精子获得专利:卵细胞买账吗?[C].《科学与现代化》2016年第1期（总第066期）.2016
[6].余伟,吴志强,贾文俊.精子“获能”获得的是什么能?[J].中学生物教学.2015
[7].蒋凌英,杨凌云,骆晔,郑琼,韩飞.有顶体精子是部分圆头精子症患者获得满意ICSI受精率的前提[C].2014浙江省妇产科学、围产医学学术年会暨妇产科常见疾病规范化治疗新进展、围产医学现状与进展专题学术论坛论文汇编.2014
[8].刘莉,何湃,采克俊,张易祥,曹访.MxA基因修饰的鸡精原干细胞体内移植获得转基因精子[J].中国畜牧杂志.2013
[9].吴斌,戴建军,张廷宇,张树山,吴彩凤.精子载体法获得植酸酶转基因猪[J].上海农业学报.2013
[10].周桦,何峻,周从容.MI期未成熟卵胞浆内单精子注射后可获得胚胎分析[J].贵阳医学院学报.2012