利用酵母双杂交系统筛选与黄瓜花叶病毒外壳蛋白互作的寄主蛋白

利用酵母双杂交系统筛选与黄瓜花叶病毒外壳蛋白互作的寄主蛋白

论文摘要

利用酵母双杂交系统,以黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)的外壳蛋白(coat protein, CP)为诱饵,从番茄叶片c DNA文库中筛选与其互作的蛋白。结果显示,诱饵载体pBT3-SUC-CMV-CP均能在酵母细胞中正确表达,无自激活活性而且对酵母无毒性;通过对酵母双杂交文库的筛选和回转验证,共获得了98个阳性克隆,分别编码67个可能与CMV-CP相互作用的蛋白,分别参与植物防御反应、光合作用、物质转运、信号转导、能量代谢、氨基酸代谢、细胞壁的形态建成、植物的激素代谢等。本研究结果表明,CMV CP可同时调控寄主的多个代谢过程,在CMV的致病过程中有多重功能。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 CMV CP的诱饵载体的构建
  •   1.2 CMV CP的毒性、自激活检测
  •   1.3 CMV CP互作寄主蛋白的筛选
  •   1.4 阳性克隆插入片段的测序和序列分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 材料
  •   3.2 CMV CP基因的扩增和诱饵载体的构建
  •   3.3 诱饵载体的毒性和自激活检测验证
  •   3.4 CMV CP互作寄主蛋白的筛选
  •   3.5 候选阳性克隆的回转杂交验证
  •   3.6 序列测定与生物信息学分析
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 宁小清,张璐,潘瑞兰,曾泉,陈保善,蒙姣荣

    关键词: 黄瓜花叶病毒,外壳蛋白,番茄,酵母双杂交系统,互作蛋白

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

    专业: 生物学,植物保护

    单位: 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西大学生命科学与技术学院,广西大学农学院

    基金: 国家自然科学基金(30870111)资助

    分类号: S432.41

    DOI: 10.13417/j.gab.038.003123

    页码: 3123-3131

    总页数: 9

    文件大小: 1368K

    下载量: 313

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