论文摘要
应用短发卡RNA（shRNA）慢病毒表达载体感染小鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）,对其M2型瞬时受体电位（TRPM2）基因进行干扰,以建立稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株。结果表明,正常PMVEC对胰酶的最大耐受浓度和嘌呤霉素最小致死剂量分别为0.4μg/mL和0.6μg/mL;然后加入0.6、2.0、4.0、8.0μg/mL嘌呤霉素筛选稳定抑制TRPM2表达的shRNA TRPM2 PMVEC株,结果在嘌呤霉素达到8μg/mL时该细胞株仍细胞生长良好; Semi-quantitative PCR和Western blot对获得阳性细胞株进行TRPM2基因和蛋白表达的检测显示, shRNA TRPM2阳性PMVEC的TRPM2基因和蛋白表达相对量显著低于阴性对照和正常对照组（P<0.01）。该研究通过shRNA慢病毒载体成功建立了稳定shRNA TRPM2 PMVEC细胞株,为进一步开展TRPM2在流感病毒诱导肺微血管内皮细胞损伤的作用机制奠定了基础。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 梁亭,李珮瑶,罗强,王少华,李军,徐明举,张瑞华,徐彤
关键词: 型瞬时受体电位离子通道,慢病毒载体
来源: 中国细胞生物学学报 2019年03期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 河北北方学院生命科学研究中心,河北北方学院预防兽医学重点实验室
基金: 国家自然科学基金(批准号:31672522,31602030),河北省第二期农业现代化产业体系蛋肉鸡创新团队专项经费(批准号:HBCT2018150207)资助的课题~~
分类号: Q78
页码: 439-445
总页数: 7
文件大小: 2638K
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标签：型瞬时受体电位离子通道论文; 慢病毒载体论文;