导读:本文包含了人肝脯氨肽酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:氨肽酶,酵母,基因,序列,论文,人肝脯。
人肝脯氨肽酶论文文献综述
王淑豪[1]（2003）在《人肝脯氨肽酶基因的克隆表达及其生化药理学性质》一文中研究指出有机磷化合物如梭曼(Soman)、沙林(Sarin)、塔崩(Tabun)、对氧磷(Paraoxon)和对硫磷(Parathion)等是一类不可逆地抑制胆碱酯酶(AchE)的剧毒化合物,主要作为化学武器或农药使用。对AchE的不可逆抑制导致神经系统中胆碱能神经功能亢进可用可逆性AChE抑制剂(如氨基甲酸酯)进行预防,用抗胆碱能药物对症治疗及使用肟类药物使有机磷化合物抑制的胆碱酯酶重活化。尽管用这些抗毒措施在防治有机磷化合物中毒时可免除死亡,但却不能很有效地控制染毒后的失能状态和毒性效应。一个新的有效的办法是用毒剂水解酶将有机磷毒剂在其未到达神经系统靶分子乙酰胆碱酯酶和胆碱受体之前在血流中水解掉。有机磷酸酸酐水解酶(Organophophorus acid anhydrolase,OPAA)[E.C.3.1.8.2],广泛存在于原核和真核生物组织中,动物实验表明肝脏和肾脏中含有丰富的有机磷化合物水解酶活性,它对有机磷化合物的高效催化水解作用已引起人们的极大关注。 我室王青定分离纯化了人肝梭曼水解酶,经电泳转印至PVDF膜后,测定了其N端10个氨基酸残基序列,序列对比显示此序列与人肝脯氨肽酶(Prolidase)[E.C.3.4.13.9]N端序列9～18个氨基酸残基有90%的同源性,得到的人肝Soman水解酶序列除缺少编码N末端前8个氨基酸的核酸序列及编码的第2个氨基酸由W变为P外,其余均与Prolidase相同。美国军事生化防御部郑笃诚等研究发现,嗜盐菌交替单胞菌属(Alteromonas)菌株胞内含有高浓度的OPAA,水解Soman和Sarin,此酶氨基酸序列与脯氨肽酶具有较高的同源性,确定两者由同一祖先的基因进化而来。 本研究以人肝为材料,从中克隆了人肝Prolidase基因,采用重组DNA技术构建人肝Prolidase叁个不同表达系统的重组质粒,分别在原核表达系统、酿酒酵母表达系统和毕赤酵母表达系统进行了表达,通过离子交换层析及凝胶过滤层析对重组蛋白进行了纯化,并探讨了其生化药理性质。主要内容如下: 1 根据文献报道的人肝Prolidase核酸序列,通过计算机辅助设计人肝Prolidase基因的引物。从人肝中提取总RNA,以此RNA反转录PCR获得的cDNA为模板,用所设计的引物进行PCR扩增,其产物经回收纯化,利用PinPoint-T载体顺利地克隆了人肝Prolidase基因,大小约1.5kb,基因全序列分析表明获得的Prolidase基因与报道序列完全相同。 2 将Prolidase基因克隆至原核表达载体pGEX4T-1中,构建了重组表达质粒pGEX4T-1-P。转化大肠杆菌BL21,获得表达菌株。IPTG诱导实现了人Prolidase基因在大肠杆菌中的表达,重组蛋白以不溶性包涵体形式存在。凝胶密度扫描分析表明,表达量约占菌体总蛋白的21%。包涵体经分离、变性、复性(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2003-10-01）
王淑豪,智庆文,付爱玲,孙曼霁[2]（2003）在《人肝脯氨肽酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达》一文中研究指出利用酶清除神经性化学毒剂及有机磷农药作为一个研究课题已经有50多年的历史。1991年美国军事研究发展及工程中心生化防御部郑笃诚等从温泉中分离了嗜盐菌交替单胞菌属(Alteromonas)菌株JD6.5,其胞内含有高浓度有机磷酸酸酐水解酶(Organophophorus acid anhydrolase,OPAA),随后确定OPAA就是脯氨肽酶。1993年又从水蛹交替单胞菌(Alteromonas undina)中纯化OPAA。(本文来源于《第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集》期刊2003-06-30）
人肝脯氨肽酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
利用酶清除神经性化学毒剂及有机磷农药作为一个研究课题已经有50多年的历史。1991年美国军事研究发展及工程中心生化防御部郑笃诚等从温泉中分离了嗜盐菌交替单胞菌属(Alteromonas)菌株JD6.5,其胞内含有高浓度有机磷酸酸酐水解酶(Organophophorus acid anhydrolase,OPAA),随后确定OPAA就是脯氨肽酶。1993年又从水蛹交替单胞菌(Alteromonas undina)中纯化OPAA。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人肝脯氨肽酶论文参考文献
[1].王淑豪.人肝脯氨肽酶基因的克隆表达及其生化药理学性质[D].中国人民解放军军事医学科学院.2003
[2].王淑豪,智庆文,付爱玲,孙曼霁.人肝脯氨肽酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[C].第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集.2003
论文知识图
