导读:本文包含了半原生质体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:小麦游离小孢子,半原生质体,愈伤组织诱导,酶解参数组合
半原生质体论文文献综述
宋唯一[1]（2005）在《小麦游离小孢子愈伤组织诱导及半原生质体外源DNA电击转化的研究》一文中研究指出电击基因转移技术是从1985 年开始,应用于植物细胞和原生质体的遗传转化的,随着生物技术的发展,现已广范应用于各种植物中。将电击转化技术用于小麦游离小孢子半原生质体,目前还无相关报道。由于小麦游离小孢子半原生质体较之小麦胚性愈伤组织原生质体易于培养,且小麦游离小孢子的培养体系已日趋完善,因此,小麦游离小孢子半原生质体是良好的电击转化受体。鉴于此,本文主要从以下叁个方面进行了研究:①对11 个不同小麦及小黑麦品种的游离小孢子进行培养及活性检测,筛选出了适合于游离小孢子培养的最佳培养基、碳源、最适培养条件,游离小孢子最佳分离方法以及最易于进行游离小孢子培养的品种;②通过酶解试验,筛选出了最佳酶解参数组合,为电击试验做好了准备;③以最佳酶解参数组合处理过的最易于进行培养的品种的小孢子半原生质体作为受体,通过导入香豆素-5-dUTP,筛选出了进行电击转化的最佳参数组合。主要试验结果如下:小麦幼穗在进行4℃低温预处理3 天后分离到的小麦小孢子的平均活性最高达到6.6%。30℃热激处理小麦幼穗后分离的小麦小孢子的平均活性最高,达到6.7%。热激处理小麦幼穗3 天后分离到小孢子的平均活性最高达到6.5%。花药接种密度为1000枚/10mL培养液的游离小孢子在培养的第1天到第4天内的平均活力最高,达到5.28%。以麦芽糖为碳源培养的游离小孢子在培养的4 天内活性最高,达到4.35%,而以蔗糖为碳源培养的游离小孢子活性最低。因此,麦芽糖为小麦游离小孢子培养的最佳碳源,蔗糖不适宜作为小麦游离小孢子培养的碳源。通过对几种游离小孢子分离方法的比较,筛选,发现磁力搅拌器法最适于进行小麦游离小孢子的分离。通过混合酶液酶解破壁试验发现能产生最薄细胞壁厚度的酶解参数组合为:1.5%的混合酶液浓度(其中纤维素酶浓度为1.4%,果胶酶的浓度为0.1%),28℃的酶解处理温度和8h的酶解处理时间。经这一参数组合处理过的小麦游离小孢子的细胞壁厚度最薄,为0.83μm,而CK(3.08μm)是这一厚度的3.7 倍。另外,通过酶解试验,还发现2%的混合酶液浓度(其中纤维素酶浓度为1.9%,果胶酶的浓度为0.1%)能产生大量原生质体,非常适于原生质体培养。通过进行游离小孢子愈伤组织诱导试验,发现Cui2B培养基最适于进行(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2005-06-10）
程在全,曾黎琼,宋令荣,王芳,徐增富[2]（1999）在《外源基因质粒pZFX2导入小麦半原生质体的研究》一文中研究指出采用电脉冲法，转化大分子复合物ＩｇＧ－荧光素进入小麦部分酶解（１２０ｍｉｎ）愈伤组织的细胞即半原生质体中，在荧光显微镜下观察发现一些细胞内有荧光发生，由此确定的较适宜脉冲转化条件如电场强度为２２５０－３０５０Ｖ／ｃｍ应用于转化外源基因ｐＺＦＸ２到小麦半原生质体，随后将其按愈伤组织的培养过程进行培养和抗ｋａｎａｍｙｃｉｎ筛选后获得成活愈伤细胞团块，存活率为１１．３％－１８．９％，这都说明已成功地将这两种物质转入了小麦细胞内，从而在小麦中可以绕过原生质体，以半原生质体作为外源基因的另一类受体系统将可能成为行之有效的转基因途径(本文来源于《西北植物学报》期刊1999年01期）
半原生质体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
采用电脉冲法，转化大分子复合物ＩｇＧ－荧光素进入小麦部分酶解（１２０ｍｉｎ）愈伤组织的细胞即半原生质体中，在荧光显微镜下观察发现一些细胞内有荧光发生，由此确定的较适宜脉冲转化条件如电场强度为２２５０－３０５０Ｖ／ｃｍ应用于转化外源基因ｐＺＦＸ２到小麦半原生质体，随后将其按愈伤组织的培养过程进行培养和抗ｋａｎａｍｙｃｉｎ筛选后获得成活愈伤细胞团块，存活率为１１．３％－１８．９％，这都说明已成功地将这两种物质转入了小麦细胞内，从而在小麦中可以绕过原生质体，以半原生质体作为外源基因的另一类受体系统将可能成为行之有效的转基因途径
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
半原生质体论文参考文献
[1].宋唯一.小麦游离小孢子愈伤组织诱导及半原生质体外源DNA电击转化的研究[D].甘肃农业大学.2005
[2].程在全,曾黎琼,宋令荣,王芳,徐增富.外源基因质粒pZFX2导入小麦半原生质体的研究[J].西北植物学报.1999