大肠杆菌细胞裂解系统的构建及其在真菌毒素降解酶表达中的应用

论文摘要

目的:大肠杆菌中分泌表达重组蛋白受限于其分泌效率,为此设计构建大肠杆菌诱导裂解系统以实现胞内重组蛋白的快速高效分泌。方法:利用大肠菌素E7对细胞的裂解能力,构建共表达目标重组蛋白和E7的大肠杆菌细胞裂解系统,使目标重组蛋白在E7表达后得以释放到培养基中。结果:首先以红色荧光蛋白（red fluorescent protein,RFP）为报告基因,在pET28a（+）载体上构建大肠杆菌素E7和红色荧光蛋白两个表达盒,通过对比分析IPTG一步诱导和IPTG-阿拉伯糖分步诱导系统蛋白质的表达效果,发现分步诱导系统能够更高效地表达并释放目标蛋白到培养基。在IPTG-阿拉伯糖分步诱导裂解系统中表达玉米赤霉烯酮降解酶基因,培养基上清液中检测到玉米赤霉烯酮降解酶有较好的表达量和较高的活性,能够在37℃反应30min的条件下降解约5. 8μg玉米赤霉烯酮毒素。结论:利用大肠菌素E7成功构建大肠杆菌细胞裂解系统,并且此系统在快速释放胞内表达外源蛋白方面有适用性。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵程程,孙长坡,常晓娇,伍松陵,林振泉

关键词: 大肠杆菌,细胞裂解系统,红色荧光蛋白,玉米赤霉烯酮降解酶

来源: 中国生物工程杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 国家粮食和物资储备局科学研究院粮油加工研究所

基金: 公益性行业(粮食)科研专项(201513006),国家自然科学基金(U1604234)资助项目

分类号: Q78

DOI: 10.13523/j.cb.20190409

页码: 69-77

总页数: 9

文件大小: 610K

下载量: 179

相关论文文献

• [1].壳寡糖对大肠杆菌细胞内生物分子动态变化的影响[J]. 江西水产科技 2017(03)
• [2].“PCR技术原理和应用”考点的复习建议[J]. 中学生物学 2017(07)
• [3].大肠杆菌细胞分裂位点决定机制概述[J]. 生物学教学 2009(06)
• [4].大肠杆菌细胞固定化方法研究进展[J]. 化学与生物工程 2010(04)
• [5].超高压对大肠杆菌细胞膜流动性的影响[J]. 中国农业科学 2009(04)
• [6].包埋-交联法固定大肠杆菌细胞制备γ-氨基丁酸的研究[J]. 中国酿造 2011(11)
• [7].壳寡糖对大肠杆菌细胞内生物分子动态变化的影响[J]. 农技服务 2017(07)
• [8].黄芩苷对大肠杆菌细胞通透性的影响[J]. 中国畜牧兽医 2017(06)
• [9].单细胞激光拉曼光谱检测重组大肠杆菌细胞表达甲酸脱氢酶[J]. 分析化学 2012(12)
• [10].人工合成DNA创造“全新微生物”[J]. 微生物学通报 2017(02)
• [11].加压CO_2对大肠杆菌细胞膜的损伤作用[J]. 微生物学通报 2013(02)
• [12].胡桃醌对大肠杆菌细胞膜的作用研究[J]. 食品科学 2012(17)
• [13].红球菌R04细胞分裂相关蛋白RHOGL008438对大肠杆菌细胞丝状化的影响[J]. 山西大学学报(自然科学版) 2017(02)
• [14].探索大肠杆菌细胞膜合成过程中脂肪酸的掺入模式[J]. 微生物学报 2017(05)
• [15].有机溶剂对大肠杆菌细胞膜的影响[J]. 天津科技大学学报 2008(04)
• [16].细菌脂肪酶在大肠杆菌细胞表面的功能性展示[J]. 生物技术通报 2014(06)
• [17].重组共表达大肠杆菌细胞从D-葡萄糖一锅法生产D-甘露糖[J]. 微生物学通报 2020(07)
• [18].成纤维细胞生长因子21在大肠杆菌细胞周质中的表达[J]. 药学学报 2016(05)
• [19].化学-渗透压法温和破碎处理下大肠杆菌细胞胞内蛋白质的释放率[J]. 江苏农业科学 2017(19)
• [20].毒素共轭化合物法筛选表达重组抗体的大肠杆菌细胞[J]. 中国医药工业杂志 2008(07)
• [21].聚乙烯亚胺/戊二醛交联法固定化重组酯酶大肠杆菌细胞[J]. 生物加工过程 2017(03)
• [22].一种蛋白可使细胞分裂停止而生长继续[J]. 中国食品学报 2013(01)
• [23].利用固定化重组大肠杆菌细胞生产D-塔格糖[J]. 中国生物工程杂志 2011(07)
• [24].腐殖酸钠对大肠杆菌的抑制作用研究[J]. 中国畜牧兽医 2014(08)
• [25].超声作用下大肠杆菌细胞膜通透性的动力学模型[J]. 声学技术 2010(05)
• [26].绿色荧光蛋白基因克隆及其表达培养基的筛选[J]. 贵州农业科学 2020(09)
• [27].共表达极端菌伴侣蛋白prefoldin提高P450 BM3突变体催化效率（英文）[J]. 生物化学与生物物理进展 2017(12)
• [28].变形杆菌脂肪酶在大肠杆菌细胞表面的展示表达及重组酶的特性[J]. 湖北大学学报(自然科学版) 2018(01)
• [29].高强度电场对大肠杆菌细胞膜的影响及致死效应[J]. 食品与发酵工业 2011(11)
• [30].薄荷精油微乳体系的构建及其抑菌性[J]. 现代食品科技 2014(11)

标签：大肠杆菌论文;  细胞裂解系统论文;  红色荧光蛋白论文;  玉米赤霉烯酮降解酶论文;