免疫显性抗原论文_钟杰,蔡宜冰,周瑶琴,徐作波,吴建云

导读:本文包含了免疫显性抗原论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:显性,免疫,抗原,病毒,流感,支原体,蛋白。

免疫显性抗原论文文献综述

钟杰,蔡宜冰,周瑶琴,徐作波,吴建云[1](2019)在《猪肺炎支原体部分血清体液免疫显性蛋白抗原的筛选鉴定》一文中研究指出旨在筛选猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)部分血清体液免疫显性蛋白抗原。利用生物信息学软件筛选到7个普遍存在于Mhp菌株中的蛋白Mhp104、Mhp299、Mhp367、Mhp462、Mhp465、Mhp477、Mhp488。将其对应的基因分别连接pGEX-6P-1载体后转化至大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白。将诱导表达目的蛋白的7个重组菌裂解液和GST工程菌裂解液分别加入谷胱甘肽板进行抗原包被,以PBS+10%FBS+2.5%脱脂奶粉为封闭液,血清和酶标二抗分别按照1∶500,1∶40 000稀释,将抗原包被板分别与11份Mhp恢复期血清和7份Mhp阴性血清进行ELISA反应。结果表明,所有7个重组融合蛋白均能以可溶形式表达,且GST-Mhp299、GST-Mhp367、GST-Mhp488能被PreScission Protease酶切。最终共筛选出5个Mhp血清体液免疫显性蛋白抗原,分别为Mhp104、Mhp367、Mhp462、Mhp477、Mhp488,从而为Mhp基因工程亚单位疫苗的研发提供了抗原靶标。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年05期)

高健,赵鼎[2](2019)在《风疹病毒结构蛋白多免疫显性区域诊断抗原的制备及其诊断效能评价》一文中研究指出对串联风疹病毒(Rubella virus,RV) 3个结构蛋白6个免疫显性区域进行制备(命名为B103),并将其应用于血清学诊断中。选取RV C aa 1–30&aa 96–123、E2 aa 31–105和E1 aa 11–39&aa 154–277&aa 389–412等6个免疫显性区域,将其串联并基因合成;将此基因片段插入TRX和His标签之间构建表达质粒;蛋白B103在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并利用Streamline Chelating亲和层析和DEAE阴离子交换层析纯化目的蛋白,Sephadex G-25分子筛分析其折迭情况及均一性;利用免疫印迹技术对蛋白B103的抗原性进行鉴定,并建立RV-IgM抗体捕获法ELISA检测技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力。蛋白B103以可溶性形式表达,其表达量约占菌体总蛋白的18.57%,经纯化后蛋白B103浓度为3.026 mg/mL,纯度为95.35%;免疫印迹实验表明蛋白B103能与RV急性期血清发生反应;对40份RV急性期血清及40份RV阴性血清进行检测发现可以很好地鉴别阴阳性血清标本;其灵敏度为92.50%,特异性为95.00%,阳性预测值为94.87%,阴性预测值为92.68%,符合率为93.75%,McNemer检验的结果提示与"金标准"诊断结果无差异,kappa=0.900,提示两种方法诊断结果一致性优异。原核表达与层析纯化可以获取抗原性优异的RV血清学诊断抗原,可以应用于RV早期诊断中。(本文来源于《生物工程学报》期刊2019年08期)

周瑶琴,游凤,钟杰,王豪举,丁红雷[3](2018)在《一种快速鉴定猪肺炎支原体免疫显性蛋白抗原的ELISA方法的建立》一文中研究指出旨在建立一种快速鉴定猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)血清体液免疫显性蛋白抗原的方法。通过构建p GEX-6P-1-mhp366重组表达质粒并转入大肠杆菌BL21(DE3),将GST-Mhp366重组蛋白进行原核表达。将GST-Mhp366重组菌和GST工程菌裂解液加入谷胱甘肽包被板进行抗原包被,分别与17份Mhp阳性血清和13份Mhp阴性血清反应,通过对抗原包被量、封闭液、血清和二抗稀释度的优化,确定间接ELISA的反应条件。最终确定GST-Mhp366重组菌和GST工程菌裂解液原液为抗原的最佳包被量,PBS+10%FBS+2.5%脱脂奶粉为最佳封闭液,分别将血清按照1∶500稀释、酶标二抗按照1∶40 000稀释作为最佳工作浓度,从而建立了一种基于间接ELISA的快速鉴定Mhp血清体液免疫显性蛋白抗原的方法,同时通过已知的血清体液免疫显性蛋白Mhp156和Mhp364对所建立的方法进行了验证。该方法的建立能够用于在基因组水平高通量筛选Mhp血清体液免疫显性蛋白抗原,并为Mhp初乳体液免疫和黏膜免疫显性蛋白抗原鉴定方法的建立奠定基础。(本文来源于《生物工程学报》期刊2018年01期)

周瑶琴,游凤,钟杰,王豪举,丁红雷[4](2017)在《快速筛选猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白抗原间接ELISA方法的建立》一文中研究指出引言猪支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS)是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hy opneumoniae,Mhp)引起的一种慢性、接触性呼吸道传染病,广泛分布于世界各地~([1])。现阶段我国主要使用灭活疫苗和弱毒疫苗来控制该病,但其免疫保护效果与人们的期望仍存在差距~([2])。基因工程疫苗是未来MPS疫苗的一个发展方向。若能在病原菌基因组编码的所有蛋白信息基础上,高通量大规模鉴定疫苗候选蛋白抗原,则能够增加基因工程疫苗研发成功的概率和提高疫苗免疫保护效果。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集》期刊2017-08-20)

许博,sybalova,LM[5](2016)在《基于在乙肝核心抗原免疫显性区域展示流感M2e肽的病毒样颗粒流感候选疫苗的研究:含4拷贝M2e的广谱保护效力》一文中研究指出当设计流感疫苗时,有一个远期目标——即设计一个具有广泛交叉反应性的疫苗,它能对任何流感病毒株引起的流感提供有效的控制。本文总结了不同的重组蛋白HBc/4M2e所固有的免疫原性和保护性能力的研究结果。这种蛋白包含融合于乙肝病(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2016年06期)

陈立,吴超,邹全明[6](2011)在《幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性Th细胞表位的系统筛选与鉴定方法》一文中研究指出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染超过全世界半数人口,是胃炎,胃溃疡、十二指肠溃疡的主要病因,并与胃癌,胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(MALT)的发生密切相关,被世界卫生组织列为胃癌的Ⅰ类致癌因子。抗生素耐药与复发提示现有临床治疗方法的严重不足。动物实验研究表明,疫苗接种可以减少Hp在胃黏膜的定植,并减轻胃黏膜的炎症反(本文来源于《第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编》期刊2011-08-01)

丛艳君,宋焕禄,薛文通[7](2010)在《花生过敏原Ara h1免疫显性抗原决定簇的鉴别》一文中研究指出为探索花生过敏原致敏机理,采用固相合成肽技术合成Ara h1的23条多肽。以花生过敏患者血清为抗体,鉴别和定位Ara h1的抗原决定簇。结果表明:Ara h1第21~34位,第89~98位,第393~403位,第498~507位,第594~605位氨基酸序列识别率在60%以上,为Arah1的抗原决定簇,其中第498~507位的多肽识别率为100%,是显性抗原决定簇,其氨基酸序列为RRYTARLKEG。用丙氨酸依次取代显性抗原决定簇的每个氨基酸,结果抗原决定簇的致敏性增强或丧失,说明Ara h1第499位和第503位的精氨酸和第502位的丙氨酸为降低Ara h1致敏性的关键氨基酸。(本文来源于《中国食品学报》期刊2010年05期)

任晓卫[8](2010)在《上海地区人群甲型流感HA抗原进化与基因进化关系研究及H1N1流感潜在免疫显性位点的筛选》一文中研究指出流感是由流感病毒引起的具有高度传染性的一种急性呼吸道疾病,由于它的传播速度比较快,且流感病毒容易发生变异,所以每年都会造成不同规模的流感流行。本研究首先借助近几年对上海地区的流感监测信息通过构建抗原进化图谱和基因进化图谱呈现上海地区近年人群甲型H3N2和H1N1亚型流感病毒的抗原进化和基因进化特点,并深入探讨了其差异的原因。同时我们筛选出了人群甲型H1N1亚型流感病毒HA1片段的潜在免疫显性位点并建立了其抗原变异预测模型,主要内容和研究结果如下:1.为研究上海地区近年来人群甲型H3N2和H1N1亚型流感病毒血凝素抗原进化和基因进化的特点,并深入探讨其抗原变异的规律,我们构建了相应的抗原进化图谱和基因进化图谱。结果显示上海地区2007-2008年甲型H3N2亚型流感病毒的抗原进化和基因进化基本上按各年份有聚集趋势,大体来说比较相似。2007和2008年的部分病毒株之间存在着抗原交叉,可能会有交叉保护。2008年上海流行株和现在的疫苗株A/Brisbane/10/2007虽然HA1基因上变异不大,但在可能的潜在免疫显性位点194处发生了变异,所以现行疫苗株可能对上海地区人群不能提供足够有效的免疫保护。研究结果同时显示上海地区2005-2008年甲型流感病毒H1N1亚型的抗原进化图谱和基因进化图谱大体上都是按各年份聚集。我们发现140位点的变异可能是近年上海地区H1N1亚型流感病毒抗原进化的主要原因。虽有一定进化,但是部分病毒株彼此存在抗原交叉保护说明这几年H1N1进化还是比较缓慢。而对于病毒株A/Shanghai/MH79/2008由于疫苗株A/Brisbane/59/2007不能对其形成有效保护,应该对它以后在上海的流行要提高警惕。为研究上海地区历年人群甲型H3N2亚型流感病毒的抗原进化和基因进化特点,我们根据H3N2抗原变异预测模型用基因序列数据预测了其抗原进化图谱,同时我们也构建了其HA1基因进化图谱。结果显示抗原进化和基因进化特点比较相似,都按年份呈现一定的规律性。为研究全球历年人群甲型H1N1亚型流感病毒血凝素抗原进化和基因进化特点,我们构建了其抗原进化图谱和基因进化图谱。结果都显示各年份进化呈现一定的规律性,但各年份之间交叉比较明显,同时看出其基因进化呈现连续进化的过程,而抗原进化是个跳跃进化的过程,在氨基酸位点N54K、T127N、H193R处的变异可能是抗原进化跳跃最主要的原因。2.我们重点研究了筛选人群甲型H1N1亚型流感病毒HA1片段潜在免疫显性位点的方法并建立其抗原变异预测模型。采用了SVM-RFE(linear)、SVM-RFE(RBF)以及随机森林模型作为筛选位点的方法,同时用支持向量机、随机森林模型和Ridge偏最小二乘回归作为预测模型,共10种组合方法,通过重复抽样技术在相同条件下比较了10种组合方法的预测效果,用验证分类误差、特异度和灵敏度作为预测效果好坏的评价指标。研究发现随机森林模型作为预测模型比其它预测模型的效果都要好,所以选用随机森林模型作为H1N1亚型流感病毒抗原变异的预测模型。随后确定了纳入模型的变量个数为30,此时SVM-RFE(linear)/RF、SVM-RFE(RBF)/RF和RF/RF的预测一致率分别为88.05%、88.05%和87.66%,预测效果都比较好。本研究筛选出了人群甲型H1N1亚型流感病毒HA1片段的23个潜在免疫显性位点,分别是36,43,54,69,71,73,80,96,121,125,127,128,140,165,169,189,192,193,204,251,270,271,282,其中有10个属于抗原决定簇区域。我们识别出了上海H1N1亚型流感病毒抗原进化图谱中两簇差异最重要的位点140。同样全球历年人群甲型H1N1亚型流感病毒抗原进化图谱中两大类间发生变异的位点N54K、T127N、H193R也属于我们筛选出的23个潜在免疫显性位点,进一步映证了我们的研究结果可靠。3.比较研究了新甲型H1N1流感病毒和中国分离的甲型H1亚型流感病毒HA基因序列,构建了其基因进化图谱。结果显示中国流行的人甲型H1亚型流感病毒以及WHO近年推荐的疫苗株和目前流行的新甲型H1N1流感病毒在HA基因进化上相距很远,从基因层面上提示我国人群既往免疫和疫苗可能不能提供有效保护。此外,新甲型H1N1流感和中国猪甲型H1亚型流感病毒在HA基因进化上仍然存在有一定的距离,表明这次始于北美的新甲型H1N1流感并不是来自于中国。通过本研究,对上海地区近年来人群甲型流感病毒的抗原进化和基因进化过程有了直观的理解,同时深入了解了其抗原变异和基因变异的规律,为防控流感提供了有价值的线索。另外,筛选出的人群甲型H1N1亚型流感病毒HA1片段的潜在免疫显性位点为WHO选择流感疫苗和H1N1亚型流感病毒的进化研究提供了科学依据。我们建立的H1N1抗原变异预测模型可在不进行HI试验的情况下预测抗原变异情况,节省了大量的人力、物力和时间,提高了WHO选择流感疫苗株的效率。(本文来源于《复旦大学》期刊2010-04-12)

王异民[9](2009)在《猪瘟病毒E2蛋白主要免疫显性抗原多肽原核表达及初步应用》一文中研究指出猪瘟是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV )引起,主要侵袭家养的猪及野猪,引起高发病率、高死亡率的烈性传染病。近20年,世界各国的猪瘟流行形式和发病特点都发生了很大的变化。美国,加拿大,欧洲的几个国家先后消灭了猪瘟,但是野猪中还是存在有猪瘟病毒。我国猪瘟状况也不例外,普遍出现了长期持续存在多点散发性猪瘟,临床上表现为非典型、温和型、亚临床和无症状的隐性感染。定期实行的猪瘟免疫抗体水平监测是针对我国控制和消灭猪瘟的最有效的辅助方法。本研究就是表达猪瘟病毒E2基因蛋白的主要抗原区,来作为抗原检测猪瘟抗体。本研究根据GeneBank中公布的猪瘟病毒C-株的E2基因序列设计了一对特异性引物,构建E2基因的原核表达载体pGEX-6P-1-E2,转化到宿主菌BL21(plys)内经IPTG诱导表达得到目的蛋白,经过Western-blot方法检测表达的目的猪瘟E2蛋白具有良好的与抗体结合的反应原性。在此基础上进行了初步应用。采用Dot-ELISA的方法检测了某猪场的猪只猪瘟抗体,结果与所送检的结果一致。本实验的结果可以为今后进一步建立准确、特异、敏感、快速的猪瘟病毒诊断方法奠定基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2009-12-01)

黄孝天,傅颖媛,莫冰,况南珍,余克花[10](2002)在《白念珠菌免疫显性抗原的分离纯化及鉴定》一文中研究指出白念球菌(candida albicans)是一种重要的条件致病性真菌,能引起皮肤粘膜感染以及致死性感染。目前,国外大多采用粗提纯抗原(含多种抗原成分)、纯化的单一抗原或单克隆抗体检测患者血中相应抗体或抗原。国内未见白念珠菌抗原的分离纯化方法的报道。本研究采用凝胶柱层析法和Western Blotting等方法分离纯化并鉴定了两种低分子量的白念珠菌免疫显性抗原。(本文来源于《中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集》期刊2002-12-01)

免疫显性抗原论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

对串联风疹病毒(Rubella virus,RV) 3个结构蛋白6个免疫显性区域进行制备(命名为B103),并将其应用于血清学诊断中。选取RV C aa 1–30&aa 96–123、E2 aa 31–105和E1 aa 11–39&aa 154–277&aa 389–412等6个免疫显性区域,将其串联并基因合成;将此基因片段插入TRX和His标签之间构建表达质粒;蛋白B103在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并利用Streamline Chelating亲和层析和DEAE阴离子交换层析纯化目的蛋白,Sephadex G-25分子筛分析其折迭情况及均一性;利用免疫印迹技术对蛋白B103的抗原性进行鉴定,并建立RV-IgM抗体捕获法ELISA检测技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力。蛋白B103以可溶性形式表达,其表达量约占菌体总蛋白的18.57%,经纯化后蛋白B103浓度为3.026 mg/mL,纯度为95.35%;免疫印迹实验表明蛋白B103能与RV急性期血清发生反应;对40份RV急性期血清及40份RV阴性血清进行检测发现可以很好地鉴别阴阳性血清标本;其灵敏度为92.50%,特异性为95.00%,阳性预测值为94.87%,阴性预测值为92.68%,符合率为93.75%,McNemer检验的结果提示与"金标准"诊断结果无差异,kappa=0.900,提示两种方法诊断结果一致性优异。原核表达与层析纯化可以获取抗原性优异的RV血清学诊断抗原,可以应用于RV早期诊断中。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

免疫显性抗原论文参考文献

[1].钟杰,蔡宜冰,周瑶琴,徐作波,吴建云.猪肺炎支原体部分血清体液免疫显性蛋白抗原的筛选鉴定[J].中国兽医学报.2019

[2].高健,赵鼎.风疹病毒结构蛋白多免疫显性区域诊断抗原的制备及其诊断效能评价[J].生物工程学报.2019

[3].周瑶琴,游凤,钟杰,王豪举,丁红雷.一种快速鉴定猪肺炎支原体免疫显性蛋白抗原的ELISA方法的建立[J].生物工程学报.2018

[4].周瑶琴,游凤,钟杰,王豪举,丁红雷.快速筛选猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白抗原间接ELISA方法的建立[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集.2017

[5].许博,sybalova,LM.基于在乙肝核心抗原免疫显性区域展示流感M2e肽的病毒样颗粒流感候选疫苗的研究:含4拷贝M2e的广谱保护效力[J].微生物学免疫学进展.2016

[6].陈立,吴超,邹全明.幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性Th细胞表位的系统筛选与鉴定方法[C].第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编.2011

[7].丛艳君,宋焕禄,薛文通.花生过敏原Arah1免疫显性抗原决定簇的鉴别[J].中国食品学报.2010

[8].任晓卫.上海地区人群甲型流感HA抗原进化与基因进化关系研究及H1N1流感潜在免疫显性位点的筛选[D].复旦大学.2010

[9].王异民.猪瘟病毒E2蛋白主要免疫显性抗原多肽原核表达及初步应用[D].吉林大学.2009

[10].黄孝天,傅颖媛,莫冰,况南珍,余克花.白念珠菌免疫显性抗原的分离纯化及鉴定[C].中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集.2002

论文知识图

检测结果瘤苗免疫小鼠在体激发特异性CTL应答富含甘氨酸和脯氨酸重复序列的华支睾...各实验组免疫小鼠激发特异性CTL应答情...一3.PRRsv病毒粒子蛋白结构示意图

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