插入片段论文_金荣愉,安欣欣,崔海峰,俞晓平,叶子弘

导读:本文包含了插入片段论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:片段,条锈病,黑麦,文库,细菌,拟南芥,鉴定。

插入片段论文文献综述

金荣愉,安欣欣,崔海峰,俞晓平,叶子弘[1](2012)在《不同插入片段长度对质粒储存稳定性的比较研究》一文中研究指出为比较不同长度的插入片段对质粒标准分子储存稳定性的影响,本研究在pEASY-T3质粒载体的基础上,构建了插入片段长度分别为186bp(含Cry1Ab)、273bp(含Cry1Ab和SPS)、880bp(含Cry1Ab、SPS、fsACP、35S、NOS和NPTII)的质粒标准分子(以下简称186、273和880)。利用荧光定量PCR技术分析3个质粒标准分子中不同基因片段在不同存储温度(-70、-20和4℃)和不同存储时间(1、3、7、14、21、28d和3、6、12个月)时的稳定性差异。结果表明:Cry1Ab的Cq(quantification cycle)值在质粒186和273中在所有3个温度条件下6个月内均保持稳定,而在12个月时,Cq值快速上升,显着高于其他时期(P<0.05);而在质粒880中的Cry1Ab的Cq值在各温度下稳定3个月就快速升高,显着高于其他时期(P<0.05)。SPS的Cq值在质粒273中在3个温度下能稳定保持6个月,SPS、fsACP、35S、NOS和NPTII片段的Cq值在质粒880中仅能稳定保持3个月。研究结果表明:含较短插入片段的质粒标准分子的稳定性高于含较长插入片段的质粒标准分子,且同一质粒标准分子中不同片段间的稳定性也存在差异。研究为质粒标准分子储存稳定性(保质期)的研究提供科学依据,同时为质粒标准分子候选物的选择提供实验参考。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2012年12期)

白大章,李桂芳,董慧芹,邱巍,杨小亮[2](2011)在《中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区349I12 BAC克隆插入片段基因组成与结构分析》一文中研究指出利用已测序的中国美利奴绵羊细菌人工染色体(BAC)文库MHC区段阳性克隆插入片段制备探针,筛选中国美利奴绵羊(新疆军垦型)混合组织cDNA文库,以期获得该MHC片段的基因组成与结构信息。用中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区域内的349I12 BAC克隆,BsaJⅠ酶切后制备α-32P放射性探针,以噬菌斑原位杂交筛选正常中国美利奴绵羊cDNA文库,并将分离所得的cDNA阳性克隆测序后进行基因结构分析。以349I12 BAC克隆制备探针经过两轮的噬菌斑原位杂交筛选,获得19个cDNA阳性克隆,经测序、比对等进一步分析确定获得17条不同序列,其中7条序列与免疫相关。绵羊20号染色体上的MHC区段包含表达序列,且多为断裂基因,对其基因结构的分析将有助于相应基因功能及调控方面的研究。(本文来源于《西北农业学报》期刊2011年08期)

王太霞,闫晓红,查敏敏,王力军,魏文辉[3](2010)在《甘蓝型油菜A基因组候选BAC克隆的筛选及其插入片段大小分析》一文中研究指出选择甘蓝型油菜A基因组10个连锁群上特有的85个SSR分子标记,合成其引物序列,采用四维PCR法筛选甘蓝型油菜-新疆野生油菜二体异附加系BAC文库,成功筛选到甘蓝型油菜A基因组39个BAC克隆,其插入片段介于50~300 kb之间,平均为120 kb。甘蓝型油菜A基因组10个连锁群BAC克隆的获得,对后续开展甘蓝型油菜A基因组染色体识别、基因染色体定位、遗传距离与物理距离间关系分析等均具有重要价值。(本文来源于《武汉植物学研究》期刊2010年06期)

范运峰,赵启祖,赵耘,邹兴启,张仲秋[4](2009)在《猪瘟病毒Thiverval株3'非编码区插入片段对病毒拯救的影响》一文中研究指出猪瘟病毒(CSFV)疫苗株Thiverval株与亲本病毒Alfort株相比,最明显的区别就是其3'-UTR含有一定长度的插入序列。本研究通过反向遗传学操作,构建了3'-UTR含有19nt、32nt以及插入片段完全缺失的CSFV Thiverval株全长cDNA感染性克隆,将突变病毒基因组进行体外转录,利用BHK-21细胞转染、PK-15细胞传代增殖的方式成功的从3种重组突变感染性克隆中拯救出活病毒粒子,表明CSFV疫苗株3'-UTR插入片段并不影响病毒的拯救。通过3'-UTR二级结构模拟,发现疫苗株的插入片段导致3'-UTR空间构型发生改变、自由能升高、影响二级结构的稳定性,可能是导致疫苗株毒力减弱的原因之一。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2009年06期)

李春来,张怀渝,罗培高,唐宗祥,任正隆[5](2006)在《抗条锈病小麦基因组中黑麦DNA插入片段的分子检测和序列分析》一文中研究指出对来自小麦品种My11与我国栽培黑麦威宁黑麦自交系R3远缘杂交后代96-1054株系的抗条锈病特性进行了分析,利用分子生物学方法对该材料背景下的黑麦染色质做了详细的鉴定、黑麦插入(本文来源于《中国遗传学会功能基因组学研讨会论文集》期刊2006-10-01)

詹勇华,陈创夫,高剑峰,王金富[6](2006)在《脉冲场凝胶电泳在BAC文库插入片段分析中的应用》一文中研究指出脉冲场凝胶电泳作为一种分离大片段DNA的方法,在基因组文库的构建及其文库鉴定中是不可缺少的实验技术。利用脉冲场凝胶电泳对已构建好的BAC文库进行了插入片段大小分析,结果显示:利用脉冲场凝胶电泳分析后,文库的平均插入片段大小为133Kb,符合文库的要求。(本文来源于《内蒙古农业科技》期刊2006年02期)

曾建新[7](2005)在《蓝光调控拟南芥生长素生物合成、极性运输的机制和随机GFP::cDNA融合基因插入片段的克隆及功能的初步分析》一文中研究指出随着生物科学的发展,作为分子生物学研究的模式植物—拟南芥越来越受到重视。研究拟南芥的不同基因在发育过程中或某种环境下基因的表达与调控,对进一步了解其它植物是十分有益的,并且为植物遗传育种的理论和应用研究提供良好的材料。本论文分两个部分:(1)以拟南芥哥伦比亚野生型col-4以及蓝光受体cry1-304、cry2和cry1cry2突变体为材料,采用半定量RT-PCR技术对蓝光对生长素生物合成和生长素的极性运输的调控进行了研究。(2)以转染随机GFP:cDNA融合基因的大量转基因拟南芥为材料,利用荧光显微镜观察筛选表达GFP:cDNA融合基因的转基因植株,及鉴定融合子的亚细胞定位。对在细胞核或在细胞核和细胞质中均表达的融合基因进行克隆,然后根据基因的序列进一步研究该基因的结构和功能。结果如下: 1 蓝光调节拟南芥生长素生物合成与极性运输关键酶基因的表达 1.1 IAA对拟南芥下胚轴伸长的诱导 在连续蓝光下,由于蓝光受体突变后,IAA的生物合成或极性运输增强,使幼苗体内的IAA已达到饱和,如果外施IAA,会因为工从过量而抑制下胚轴伸长;或者由于植物本身的IAA含量已满足需要,使IAA的信号传导达到最佳状态,当外施IAA时,植物不再对其发生反应,相反会抑制茎的伸长。 1.2 极性运输抑制剂NPA对拟南芥下胚轴伸长的抑制 结果表明,连续白光、蓝光或红光下,随NPA施用浓度增加,野生型和突变体的下胚轴的伸长受到明显抑制,但是蓝光下,较高浓度的NPA对蓝光受体突变体下胚轴伸长的抑制程度比连续白光或红光下的要弱,说明蓝光受体突变后,可能促进了拟南芥幼苗体内参与IAA极性运输的酶基因的表达增加,而导致蓝光受体突变体的下胚轴伸长。 1.3 不同的蓝光处理时间和光照强度对IAA生物合成关键酶、IAA诱导蛋白酶以及IAA极性运输相关蛋白酶基因的调节 蓝光处理4-8 h时突变体中IAA5的表达量增加,其中cry1-304和cry1cry2中的表达水平比cry2中的表达水平高,而野生型中的表达量则下降,暗示蓝光受体参与IAA信号传导途径,通过负调节IAA诱导蛋白的表达而抑制植物茎的伸长。不同光照强度处理0.5 h后,突变体中IAA1和IAA5的表达量普遍高于野(本文来源于《湖南农业大学》期刊2005-05-15)

李春来[8](2005)在《抗条锈病小麦基因组中黑麦DNA插入片段的分子检测和序列分析》一文中研究指出条锈病(Puccinia striiformis f.sp. tritici West.)是我国小麦的主要病害。目前,由于小麦条锈病抗源匮乏,推广品种抗性单一,使条锈病成为我国,特别是西南小麦生产区最严重的病害,导致小麦大幅减产,造成巨大经济损失。鉴定新的条锈病抗源,培育抗条锈病品种,是解决这一问题的关键。黑麦(Secale cereale L.)是小麦的近缘植物,具有丰富的抗性基因资源,在小麦抗条锈病育种中发挥了重要的作用。我国利用的黑麦抗性资源大多是来自欧洲栽培黑麦,其抗性基因Yγ9,已丧失对目前条锈病流行生理小种的抗性。我国有丰富的栽培黑麦资源,但尚未得到有效的开发和利用。 本研究对来自小麦品种My11与我国栽培黑麦威宁黑麦自交系R3远缘杂交的抗条锈病后代96-1054株系的抗条锈病特性进行了鉴定和遗传分析,利用分子生物学方法对该材料背景下的黑麦染色质做了详细的鉴定、黑麦插入DNA片段克隆和序列分析,并对96-1054的抗性来源及其在小麦遗传改良中的利用价值进行了讨论,主要结果如下: 1.条锈病抗性调查和遗传分析表明,小麦株系96-1054在苗期对条锈病流行生理小种条中29、30、31、水源系混合菌系免疫,成株期高抗,抗性反应型为0;-1,其中株系96-1054-4,96-1054-9和96-1054-10的条锈病抗性受两对及以上的基因控制,呈隐性遗传;其余株系与感病亲本My11的正反交F_1表现感病(反应型为4),F_2符合1抗:3感分离比,其条锈病抗性为单基因控制的隐性遗传。小麦96-1054株系的高抗条锈病特性与它的栽培黑麦亲本R3的高抗条锈病特性有关。 2.用黑麦特异性散布重复序列pSc119.1、pSc10C和pSc20H引物对96-1054株系基因组DNA进行了扩增,结果表明在96-1054-9和96-1054-11株系中均分别扩增出745bp、1012bp和1494bp的黑麦特异性条带,其余株系没有发现黑麦特异性条带的扩增,表明该两株系含有长度不等的黑麦DNA重复序列片段插入,两株系间扩增强度不同,前者特异性扩增条带强于后者。 3.用27对已定位的黑麦特异性SSR引物(SCM编号)对96-1054株系基因组DNA进行检测,结果表明只有定位在黑麦1RS上的引物SCM9在96-1054-9和96-1054-11株系扩增出210bp的黑麦特异性条带。因此,该两株系含有黑麦1RS染色体上的一段简单重复序列。(本文来源于《四川农业大学》期刊2005-05-01)

肖祥[9](2003)在《来自人马来丝虫内生菌Wolbachia的63kb细菌人工染色体插入片段的序列测定及分析》一文中研究指出Wolbachia是通过母系遗传的内生菌 ,寄生于多种节肢动物 ,也广泛分布在丝虫体内。 Wolbachia与丝虫脂多糖诱导的炎症反应和发病机制直接有关。宿主的抗体能识别Wolbachia编码的分子 (包括 Wolbachia表面蛋白 )。最近的人体实验(本文来源于《国外医学(寄生虫病分册)》期刊2003年01期)

刘振辉,张士璀[10](2002)在《检测cDNA文库克隆中插入片段大小的简易方法》一文中研究指出在cDNA文库克隆的大规模测序之前 ,一般需对克隆中插入片段的大小进行检测。传统的检测方法是首先用煮沸法[1,2]或碱裂解法[1,3]提取质粒DNA ,然后用限制性内切酶进行酶切分析。在对大量的克隆进行检测时 ,这种方法则显得十分烦琐、费时。Zon等[4(本文来源于《海洋科学》期刊2002年11期)

插入片段论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

利用已测序的中国美利奴绵羊细菌人工染色体(BAC)文库MHC区段阳性克隆插入片段制备探针,筛选中国美利奴绵羊(新疆军垦型)混合组织cDNA文库,以期获得该MHC片段的基因组成与结构信息。用中国美利奴绵羊MHC ClassⅡb区域内的349I12 BAC克隆,BsaJⅠ酶切后制备α-32P放射性探针,以噬菌斑原位杂交筛选正常中国美利奴绵羊cDNA文库,并将分离所得的cDNA阳性克隆测序后进行基因结构分析。以349I12 BAC克隆制备探针经过两轮的噬菌斑原位杂交筛选,获得19个cDNA阳性克隆,经测序、比对等进一步分析确定获得17条不同序列,其中7条序列与免疫相关。绵羊20号染色体上的MHC区段包含表达序列,且多为断裂基因,对其基因结构的分析将有助于相应基因功能及调控方面的研究。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

插入片段论文参考文献

[1].金荣愉,安欣欣,崔海峰,俞晓平,叶子弘.不同插入片段长度对质粒储存稳定性的比较研究[J].农业生物技术学报.2012

[2].白大章,李桂芳,董慧芹,邱巍,杨小亮.中国美利奴绵羊MHCClassⅡb区349I12BAC克隆插入片段基因组成与结构分析[J].西北农业学报.2011

[3].王太霞,闫晓红,查敏敏,王力军,魏文辉.甘蓝型油菜A基因组候选BAC克隆的筛选及其插入片段大小分析[J].武汉植物学研究.2010

[4].范运峰,赵启祖,赵耘,邹兴启,张仲秋.猪瘟病毒Thiverval株3'非编码区插入片段对病毒拯救的影响[J].中国预防兽医学报.2009

[5].李春来,张怀渝,罗培高,唐宗祥,任正隆.抗条锈病小麦基因组中黑麦DNA插入片段的分子检测和序列分析[C].中国遗传学会功能基因组学研讨会论文集.2006

[6].詹勇华,陈创夫,高剑峰,王金富.脉冲场凝胶电泳在BAC文库插入片段分析中的应用[J].内蒙古农业科技.2006

[7].曾建新.蓝光调控拟南芥生长素生物合成、极性运输的机制和随机GFP::cDNA融合基因插入片段的克隆及功能的初步分析[D].湖南农业大学.2005

[8].李春来.抗条锈病小麦基因组中黑麦DNA插入片段的分子检测和序列分析[D].四川农业大学.2005

[9].肖祥.来自人马来丝虫内生菌Wolbachia的63kb细菌人工染色体插入片段的序列测定及分析[J].国外医学(寄生虫病分册).2003

[10].刘振辉,张士璀.检测cDNA文库克隆中插入片段大小的简易方法[J].海洋科学.2002

论文知识图

菌落PCR检测转化子pUcrtEB/pUcrtYI;...扩增的α-Crystallin突变体基因部分测...四环素可逆调节抑制VEGF表达小鼠模型慢病毒载体构建示意图鉴定AHA2T-DNA插入突变体A.aha2-1;B...鉴定AHA5T-DNA插入突变体A.aha5-1;...

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