牛传染性鼻气管炎病毒壳膜蛋白VP8的原核表达及抗血清制备

牛传染性鼻气管炎病毒壳膜蛋白VP8的原核表达及抗血清制备

论文摘要

牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)是牛传染性鼻气管炎的病原体,IBRV壳膜蛋白VP8在病毒复制及致病过程中发挥重要作用。本试验将表达IBRV VP8基因的重组表达质粒pET-32a-VP8转化入表达宿主Transetta(DE3)菌株内,采用37℃,IPTG浓度为1.0 mol/L诱导表达。将表达产物通过镍离子亲和层析纯化,将纯化的VP8融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗血清。结果表明,重组蛋白VP8以包涵体的形式存在,其相对分子质量约110 kDa,Western Blot分析结果表明:该蛋白与抗IBRV的血清能发生特异性反应,以其所制备的抗血清与IBRV及病毒壳膜蛋白VP8特异性结合。结果表明,我们获得的IBRV VP8蛋白具备良好的免疫原性,所制备的抗血清将为研究IBRV致病机理提供科学依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 VP8重组蛋白的诱导表达
  •     1.2.2 融合蛋白的可溶性鉴定
  •     1.2.3 表达产物的纯化
  •     1.2.4 表达产物的Western Blot分析
  •     1.2.5 多克隆抗体的制备
  • 2 结果与分析
  •   2.1 VP8蛋白的原核表达
  •   2.2 融合蛋白的可溶性分析
  •   2.3 融合蛋白的最佳IPTG浓度
  •   2.4 融合蛋白的纯化结果
  •   2.5 Western Blot分析
  •   2.6 多克隆抗体的制备
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 马振邦,李霄阳,许健,王萍,李永清

    关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒,蛋白,原核表达,多克隆抗体

    来源: 中国兽医杂志 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 江西农业大学动物科学技术学院,北京市农林科学院畜牧兽医研究所

    基金: 现代农业技术体系北京市奶牛创新团队岗位专家工作经费项目(bjcystx-ny-3),国家重点研发计划重点专项(2016YFD050095),北京市奶牛创新团队项目(BAIC05-2019)

    分类号: S852.653

    页码: 26-29+33

    总页数: 5

    文件大小: 869K

    下载量: 17

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