3株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及其基因分型

3株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及其基因分型

论文摘要

为确定牛呼吸道传染病的病原以及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)在临床健康牛群中是否存在持续性感染,本研究采集了内蒙古自治区和黑龙江省两个牛场牛鼻拭子46份及肺脏样品8份,采用MDBK细胞进行病毒分离培养,经BVDV特异性引物RT-PCR检测有3份样品为阳性。利用间接免疫荧光检测3株阳性样品,可以观察到特异性荧光,表明分离得到3株BVDV,分别命名为480、A0583和Lung-6。进一步研究显示480、A0583和Lung-6均为非致细胞病变型。对3株分离病毒的5’端非编码区和Npro基因进化树分析显示3株病毒均属于BVDV1型,其中480株属于BVDV1c亚型,A0583株和Lung-6株同属于BVDV1m亚型。本研究首次在国内同一个牛场分离到BVDV1m(A0583)和BVDV1c(480)两个基因亚型。本研究为我国BVDV-1型不同基因亚型的抗原关系分析及BVDV疫苗的研制奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料及临床样品
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 病毒的分离
  •   1.4 分离病毒的RT-P CR检测及测序分析
  •   1.5 分离株的间接免疫荧光 (IFA) 鉴定
  •   1.6 分离株的TCID50的测定
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 病毒分离与RT-P CR检测结果
  •   2.2 分离株的IFA鉴定及TCID50的测定结果
  •   2.3 分离株Npro基因序列分析及其分子进化树的构建
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 向文杰,林俊,宋文凤,李德栋,薛飞,朱远茂

    关键词: 牛病毒性腹泻病毒,分离鉴定,基因分型

    来源: 中国预防兽医学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室

    基金: 国家重点研发计划课题:牛羊虫媒病和慢病毒病的诊断与检测新技术研究(2016YFD0500908),国家自然科学基金(31372452)

    分类号: S852.653

    页码: 422-425

    总页数: 4

    文件大小: 642K

    下载量: 172

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