导读:本文包含了氯乙醇论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:1,2-二氯乙烷中毒,2-氯乙醇,星形胶质细胞,基质金属蛋白酶-9
氯乙醇论文文献综述
王彤[1]（2019）在《p38 MAPK信号通路在2-氯乙醇致星形胶质细胞上调MMP-9表达中作用的研究》一文中研究指出目的:亚急性1,2-二氯乙烷(1,2-dichloroethane,1,2-DCE)中毒是严重危害我国劳动者健康与生命的职业病之一,脑水肿是其主要病理过程,但目前对1,2-DCE引起脑水肿的机制仍不明确。1,2-DCE具有脂溶性,脑组织是其主要蓄积并损害的靶器官。1,2-DCE在脑组织中经细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)代谢生成2-氯乙醇(2-chloroethanol,2-CE)。2-CE作为代谢中间产物具有比1,2-DCE更强的生物毒性,在1,2-DCE神经毒性作用中扮演重要角色。我们前期的体外实验表明,2-CE暴露会导致原代培养的大鼠脑星形胶质细胞(astrocyte,AS)中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)从转录水平上表达增多。同时体内实验也证实,MMP-9表达增多是小鼠亚急性1,2-DCE中毒性脑水肿的早期事件。MMP-9是一种能降解基底膜中胶原成分的蛋白水解酶,基底膜是血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的重要组成结构,MMP-9过表达会导致BBB通透性增高,引起血管源性脑水肿。在我们前期研究中,2-CE暴露使AS中活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)含量增多,增多的ROS可介导p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)信号通路的活化,p38 MAPK信号通路参与调控MMP-9的表达上调。MMP-9的基因启动子区域包含NF-κB及AP-1的结合位点。但在2-CE暴露的AS中NF-κB及AP-1是否被p38 MAPK信号通路的激活而参与调控MMP-9表达,相关调控机制仍不明确。此外,白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)是一类能激活细胞表达MMP-9的炎症因子,诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)诱导产生的NO作为活性氮氧化物(reactive nitrogen oxide species,RNOS)能激活MMP-9的表达,二者的表达增多都可加重脑水肿。p38 MAPK、NF-κB和AP-1是否参与调控IL-1β和iNOS表达的相关研究数据较少。本研究通过在AS暴露于2-CE前,提前给予p38 MAPK、NF-κB及AP-1特异性抑制剂SB202190、PDTC和SR11302来探讨p38 MAPK信号通路及转录因子NF-κB和AP-1与MMP-9、IL-1β和iNOS过表达的关系,为揭示1,2-DCE中毒性脑水肿机制提供参考数据。方法:1、取出生3天内的Wistar仔鼠,取双侧大脑皮质剪碎,胰酶消化分散细胞,将细胞接种到培养皿中,传代纯化3~4次。经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫荧光染色鉴定,纯度大于95%的AS可进行后续实验。2、用含5%胎牛血清的DMEM培养基将2-CE、SB202190、吡咯烷二硫代甲酸铵(ammonium pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)和SR11302储备液稀释到使用浓度。3、第一部分,2-CE对AS内相关蛋白表达影响随时间变化,AS暴露于30 mM2-CE,分别刺激0、1、2、4、8、12、24、48 h。收集细胞,采用Western Blotting法检测p-p38、p38、p65、p50、p-c-Jun、c-Jun、p-c-Fos、c-Fos、MMP-9、IL-1β和iNOS蛋白水平。收集培养基,采用ELISA试剂盒检测培养基中MMP-9蛋白水平。4、第二部分,不同浓度2-CE对AS内相关蛋白表达的影响,AS分别暴露于0、7.5、15和30 mM 2-CE,刺激12 h。收集细胞采用Western Blotting法检测p-p38、p38、p65、p50、p-IκBα、IκBα、p-c-Jun、c-Jun、p-c-Fos、c-Fos、MMP-9、IL-1β和iNOS蛋白水平,采用Real time RT-PCR法检测p38、p65、IκBα、c-Jun、c-Fos、MMP-9、IL-1β和iNOS的mRNA水平。采用免疫荧光化学染色法检测AS中p65和IL-1β的蛋白水平以及p65的核位移。收集培养基,采用ELISA试剂盒检测培养基中MMP-9蛋白水平。5、第叁部分,使用p38 MAPK信号通路抑制剂SB202190、NF-κB抑制剂PDTC和AP-1抑制剂SR11302对细胞内相关蛋白进行抑制。细胞分为空白对照组、溶剂对照组、抑制剂对照组、30 mM 2-CE组、抑制剂(SB202190、PDTC或SR11302)干预组。空白对照组不予任何处理;溶剂对照组仅予0.1%DMSO;抑制剂对照组分别给予浓度为30μM SB202190、25μM PDTC或10μM SR11302;SB202190干预组以浓度为1,10,30μM SB202190提前干预1 h,PDTC干预组以浓度为10,25μM PDTC提前干预2 h,SR11302干预组以浓度为5,10μM SR11302提前干预1 h。干预结束后,所有干预组和30 mM 2-CE组的细胞均给予30 mM 2-CE刺激12小时。收集细胞采用Western Blotting法检测p-p38、p38、p65、p-IκBα、IκBα、p-c-Jun、c-Jun、MMP-9、IL-1β和iNOS蛋白水平,采用Real time RT-PCR法检测p38、p65、IκBα、c-Jun、MMP-9、IL-1β和iNOS的mRNA水平。采用免疫荧光化学染色法检测AS中p65的蛋白水平以及p65的核位移。收集培养基,采用ELISA试剂盒检测培养基中MMP-9蛋白水平。6、统计分析采用单因素方差分析(ANOVA)以及Student-Newman-Keuls(SNK)检验。P<0.05,作为差异具有统计学意义的判断标准。结果:1、2-CE对AS内相关蛋白表达的影响随时间变化的研究结果显示,30 mM2-CE暴露1 h后,c-Fos磷酸化水平和蛋白水平开始升高。2 h后,p38磷酸化水平和c-Jun蛋白水平开始升高。4 h后,c-Jun磷酸化水平、IL-1β和iNOS蛋白水平开始升高。8 h后,p65、p50和MMP-9蛋白水平开始升高(P<0.05)。但p38的蛋白表达水平不受2-CE暴露时间的影响。2、不同浓度2-CE对AS内相关蛋白表达影响的研究结果显示,2-氯乙醇暴露上调AS中p38、IκBα、c-Jun和c-Fos磷酸化水平,上调p65、c-Jun、c-Fos、MMP-9、IL-1β和iNOS蛋白以及mRNA水平,p50蛋白水平和IκBα的mRNA水平也上升,而IκBα的蛋白表达水平下降(P<0.05)。但各组间p38的蛋白以及mRNA表达水平差异无统计学意义。此外,随2-CE暴露浓度的增加,AS中IL-1β和细胞核中p65荧光强度逐渐增强,p65核位移率和细胞核中p65蛋白水平升高,细胞质中p65蛋白水平差异无统计学意义。3、与空白对照组相比,30 mM 2-CE组AS中p38、IκBα和c-Jun的磷酸化水平上升,p65、c-Jun、MMP-9、IL-1β和iNOS蛋白以及mRNA表达水平上升,IκBα的mRNA水平也上升,而IκBα的蛋白表达水平下降(P<0.05)。与30 mM 2-CE组相比,SB202190干预可降低AS中p38、IκBα和c-Jun的磷酸化水平,降低p65、c-Jun、MMP-9、IL-1β和iNOS蛋白以及mRNA表达水平,降低IκBα的mRNA水平,而使IκBα的蛋白水平升高(P<0.05)。但各组间p38的蛋白以及mRNA表达水平差异无统计学意义。此外,与空白对照组相比,30 mM 2-CE组p65核位移率和细胞核中p65蛋白水平升高,而SB202190干预后二者水平显着下降(P<0.05),随抑制剂浓度的升高,p65在细胞核中荧光强度逐渐减弱。4、与30 mM 2-CE组相比,PDTC干预可降低AS中IκBα磷酸化和mRNA水平,而使IκBα蛋白水平升高,降低MMP-9和IL-1β蛋白和mRNA水平,降低iNOS蛋白水平(P<0.05),但PDTC干预对AS中iNOS的mRNA水平无影响。5、与30 mM 2-CE组相比,SR11302干预可降低c-Jun的mRNA水平,降低MMP-9、IL-1β和iNOS蛋白和mRNA水平。结论:1、2-CE暴露使AS中MMP-9、IL-1β和iNOS的蛋白和mRNA表达水平上升。2、2-CE暴露通过激活AS内p38 MAPK信号通路上调NF-κB和AP-1转录激活能力。3、p38 MAPK通过NF-κB和AP-1来调控2-CE暴露后AS表达MMP-9、IL-1β和iNOS的过程。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-03-01）
罗超红,郭静静,徐天胜,李坤阳,金亚平[2]（2019）在《2-氯乙醇经NMDAR/cAMP/PKA信号通路致星形胶质细胞AQP4蛋白表达增强》一文中研究指出目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)/环磷酸腺苷(cAMP)/cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)信号通路在2-氯乙醇上调星形胶质细胞(AS)表达水通道蛋白-4(AQP4)中的作用。方法①取对数生长期的AS予剂量为0.0、7.5、15.0和30.0 mmol/L 2-氯乙醇(设为相应剂量组)刺激12 h后,收集细胞进行检测。②取对数生长期的AS为空白对照组、抑制剂(MK-801或H89)对照组、2-氯乙醇组、抑制剂(MK-801或H89)干预组。空白对照组不予任何处理;抑制剂对照组仅予浓度为10.0μmmol/L MK-801或15.0μmmol/L H89处理;MK-801干预组以浓度为10.0μmmol/L的MK-801提前干预30 min,H89干预组以浓度为15.0μmmol/L的H89提前干预1 h;干预结束后,2-氯乙醇组和MK-801、H89干预组AS均予浓度为30.0 mmol/L的2-氯乙醇刺激12 h。③收集各组AS,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应法检测AS内AQP4、NMDAR受体主亚基(NR1)、NMDAR受体2B亚基(NR2B)、钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的蛋白和mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法检测磷酸化CaMKⅡ(p-CaMKⅡ)和PKA的表达;采用比色法检测AS内钙离子(Ca~(2+))浓度,采用酶联吸附试验检测腺苷酸环化酶(AC)活力和cAMP水平。结果①30.0 mmol/L剂量组AS内AQP4、NR1、NR2B的蛋白与mRNA,PKA蛋白、CaMKⅡmRNA的相对表达水平以及p-CaMKⅡ/CaMKⅡ蛋白比值、Ca~(2+)浓度、AC活力、cAMP水平均高于0.0 mmol/L剂量组(P<0.05)。PKA蛋白相对表达水平和Ca~(2+)浓度均随着2-氯乙醇剂量的增加而增加(P<0.05)。②2-氯乙醇组AS内AQP4蛋白相对表达水平、Ca~(2+)浓度均高于空白对照组和MK-801对照组(P<0.05),MK-801干预组AS内AQP4蛋白相对表达水平和Ca~(2+)浓度均低于2-氯乙醇组(P<0.05);2-氯乙醇组AS内AQP4和PKA蛋白相对表达水平均高于空白对照组和H89对照组(P<0.05),H89干预组AS内AQP4和PKA蛋白相对表达水平均低于2-氯乙醇组(P<0.05)。结论 2-氯乙醇可通过激活NMDAR/cAMP/PKA信号通路诱导AS中AQP4的表达增强。(本文来源于《中国职业医学》期刊2019年01期）
罗超红[3]（2019）在《NMDAR/cAMP/PKA信号通路在2-氯乙醇致星形胶质细胞内AQP4表达调控中作用的研究》一文中研究指出目的:1,2-二氯乙烷(1,2-dichloroethane,1,2-DCE)系卤代烃类化合物,普遍作为工业上的有机溶剂之一。接触高浓度1,2-DCE极易引起脑损伤,中毒性脑病是1,2-DCE中毒的主要临床表现,其主要病理过程是脑水肿。水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是一组调控水分子及其他小分子进出细胞的跨膜转运蛋白。脑组织中以AQP4表达最为丰富。AQP4广泛分布在星形胶质细胞(Astrocytes,AS)的终足上,其表达水平决定AS对水的通透性。研究资料显示,AQP4的表达增强与脑水肿的发生有关,并且AQP4的表达可能受到N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)/环磷酸腺苷(Cyclic Adenosine monophosphate,cAMP)/cAMP依赖性蛋白激酶(protein kinase A,PKA)信号通路的调控。本研究以AS为研究对象,通过探讨NMDAR/cAMP/PKA信号通路在2-氯乙醇(2-chloroethanol,2-CE)上调AS内AQP4表达中的作用,为揭示亚急性1,2-DCE中毒性脑水肿的机制提供相关的实验参考数据。研究方法:以原代培养的AS为研究对象,经0、7.5、15、30 mmol/L的2-CE暴露12 h后,或用NMDAR抑制剂MK801(10μmmol/L)预处理30 min、PKA抑制剂H89(15μmmol/L)预处理1 h后,再用30 mmol/L 2-CE暴露12 h,收集细胞。分别检测AS内AQP4、NMDAR亚单位NR1和NR2B、钙调素(calmodulin,CaM)、钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaM-dependent protein kinase II,CaMKⅡ)及PKA的mRNA和蛋白表达,并检测AS内钙离子(calcium,Ca~(2+))浓度、腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)活性及环磷酸腺苷(cyclc adenosine monophosphate,cAMP)含量。结果:1、与对照组相比,30 mmol/L 2-CE暴露组AS中AQP4、NR1和NR2B、CaM、p-CaMKⅡ、p-CREB、PKA的蛋白表达水平显着升高(P<0.05);此外,30 mmol/L 2-CE暴露组的AS中AQP4、NR1、NR2B、CaMKⅡ和CREB的mRNA水平也显着高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,15 mmol/L和30 mmol/L 2-CE暴露组的AS中Ca~(2+)浓度、AC活性、cAMP含量均显着升高(P<0.05)。2、NMDAR的非竞争性拮抗剂MK-801预处理组的AS中AQP4的蛋白表达水平及Ca~(2+)浓度显着低于单纯2-CE暴露组(P<0.05);PKA的拮抗剂H89预处理组的AS中PKA和AQP4蛋白表达水平也显着低于单纯2-CE暴露组(P<0.05)。结论:1、2-CE暴露可诱导AS内AQP4的表达增强。2、NMDAR/cAMP/PKA信号通路在2-CE致AS内AQP4表达上调的过程中发挥重要作用。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-02-01）
甘易玲,徐红英,夏薇,刘小媛,朱佑明[4]（2018）在《解氯乙醇酊治疗大鼠急性氯气中毒的作用机制》一文中研究指出目的探讨解氯乙醇酊缓解氯气中毒导致的肺部炎症的作用机制。方法将64只SD大鼠随机分为空白组、正常组、染毒组和解氯乙醇酊组,每组16只,空白组及正常组不进行染毒,以空气为对照;染毒组和解氯乙醇酊组分别以浓度为1000ppm和1500ppm的氯气动式染毒,各组每个浓度8只,均染毒10min。将所有SD大鼠染毒后30min进行灌胃给予1.2mL生理盐水(正常组、染毒组)或解氯乙醇酊(空白组、解氯乙醇酊组)。分别在染毒后12h和24h采集标本,以ELISA法测定肺泡灌洗液和血清中炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-8)水平,以硫代巴比妥酸反应产物(TBARs)实验测定肺组织脂质过氧化物水平,ELISA法检测肺泡灌洗液及肺组织中脂氧素,采用免疫火箭电泳法检测血浆纤维结合蛋白的含量,测定肺湿干重比值,观察肺组织病理变化。结果与空白组及正常组相比,染毒组肺泡灌洗液和血清中炎性细胞因子含量、肺组织中的TBARs含量、肺泡灌洗液及肺组织中脂氧素水平和肺湿干重比值均显着增加,而血浆纤维结合蛋白水平显着降低。与染毒组相比,解氯乙醇酊组肺泡灌洗液和血清中细胞因子含量、肺组织中的TBARs、肺湿干重比值均显着下降,而肺泡灌洗液及肺组织中脂氧素和血浆纤维结合蛋白的含量显着升高。结论氯气中毒后肺组织水肿、炎症反应明显,解氯乙醇酊可通过降低炎症因子、肺组织中的TBARs含量及上调脂氧素和血浆纤维结合蛋白水平等缓解氯气中毒导致的肺部炎症。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2018年06期）
钟振华,刘荷英,王鹏,程奇珍[5]（2018）在《气相色谱-质谱法测定盐酸氯哌丁原料药中2-氯乙醇的残留量》一文中研究指出建立了盐酸氯哌丁原料药中的基因毒性杂质2-氯乙醇残留量的测定方法。采用气相色谱-叁重四极杆质谱仪,以多反应监测模式(MRM)进行监测。仪器条件为EI源温度:230℃;电子能量:70e V;碰撞气:高纯氮气;碰撞气流速:1.5 m L/min。法线性范围为52.5~840 ng/m L,线性回归方程为y=0.975065x+13.440439,相关系数R2=0.9997;平均回收率为99.0%(n=9),RSD=2.0%;重复性实验RSD=1.3%(n=6);精密度RSD=0.81%。方法适合用于盐酸氯哌丁原料药中的2-氯乙醇残留量的检测。(本文来源于《分析试验室》期刊2018年09期）
付步芳,程东升,王春仁[6]（2018）在《PTA球囊扩张导管中2-氯乙醇残留量的评价方法》一文中研究指出目的建立气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法分析ECH残留量,以便对PTA球囊扩张导管中的ECH残留量水平进行安全性评价。方法以丙酮为溶剂,超声提取样品中的2-氯乙醇。色谱柱ZB-624,进样口温度180℃,分流比1∶1,载气为高纯He,流速1.5 g/m L。升温条件:50℃(1 min),5℃/min升至100℃。质谱条件:离子源温度230℃,接口温度250℃,电子能量70 e V。以保留时间和质谱全扫描方式进行定性分析,质荷比m/z 35~500。选择离子监测模式外标法定量,定量离子m/z=43。结果该方法理论塔板数在56753以上,在1.44~22.96μg/m L浓度范围,线性关系良好,r=0.999,平均加样回收率为99.1%(n=5,RSD<5%),检出限为0.41μg/m L。样品中未检出ECH残留。结论建立的基于GC-MS的2-氯乙醇残留量的分析方法灵敏、快速、准确,可供企业对PTA球囊扩张导管产品的质量控制和检测同行参考。(本文来源于《北京生物医学工程》期刊2018年01期）
付步芳,王春仁[7]（2017）在《医疗器械检测用2-氯乙醇标准物质的研究》一文中研究指出目的:以2-氯乙醇(Ethylene Chlorohydrin,ECH)为原料制备用于医疗器械检测用的ECH标准物质。方法:采用气相色谱质谱连用技术对原材料进行筛选和考核,采用气相色谱技术对ECH标准物质的含量进行测定,采用多家实验室协作标定的方式进行定值,并进行不确定度评定,另对ECH标准物质的均匀性和稳定性进行了考察。结果:所研制的ECH标准物质原料纯度高,量值稳定,ECH含量为97.92%±0.02%;均匀性考察结果:ECH含量的统计量F=0.70,小于F(0.05)临界值2.76;稳定性试验结果表明ECH标准物质在12个月时纯度的相对标准偏差RSD是0.46%。结论:所研制的ECH标准物质纯度高,不确定度小,均匀性和稳定性良好,适宜作为医疗器械检测用ECH标准物质。(本文来源于《中国药事》期刊2017年08期）
陶少辉,毕丽媛[8]（2017）在《非均相共沸精馏法分离2-氯乙醇-水》一文中研究指出以环己烷、甲苯和1,2-二氯乙烷为候选共沸剂,采用非均相共沸精馏法从2-氯乙醇/水共沸物中分离出高浓度2-氯乙醇产品。通过ASPEN物性分析功能研究了不同共沸剂与2-氯乙醇/水体系形成共沸物的情况,并根据叁元相图进行了过程的概念设计。在此基础上,通过ASPEN模拟和优化了采用不同共沸剂的分离过程的工艺条件,并以年度总费用最小为依据选择了甲苯为共沸剂,此时最优工艺条件为:共沸塔总理论板数为20块塔板,进料位置在第8块塔板,回流比为2;脱水塔总理论板数为30块塔板,进料位置在第20块塔板,回流比为1.5。在此工艺条件基础上进行了实验,结果表明2-氯乙醇产品纯度可达到99%以上,且回收率在93.5%,实验结果与模拟结果能较好吻合,文中的研究可为2-氯乙醇-水分离的工业化提供参考。(本文来源于《化学工程》期刊2017年04期）
吴振兴,付步芳,王书晗,王春仁,冯晓明[9]（2015）在《气相色谱-质谱法测定人工晶状体中2-氯乙醇》一文中研究指出人工晶状体样品用丙酮超声提取使残留的2-氯乙醇(ECH)进入溶液中,所得提取液用气相色谱-质谱法(GC-MS)测定其中ECH的含量。GC分析条件:1采用ZB-624色谱柱,进样品温度180℃,分流比1比1;2载气为高纯氦气,流量为1.5mL·min~(-1);3升温程序:初始温度50℃,保持1 min;以5℃·min~(-1)速率升至100℃,保持1 min。MS分析条件:离子源温度230℃,接口温度250℃,电子能量70eV。以保留时间和质谱全扫描方式进行定性分析,质量数范围m/z35~500。以选择离子监测模式定量,质量数m/z43的条件下用外标法定量。方法的理论塔板数在56 753以上。ECH的线性范围为1.44~22.96mg·L-1,检出限(3S/N)为0.41mg·L~(-1)。用标准加入法测得方法的回收率为99.1%,测定值的相对标准偏差(n=5)小于5%。(本文来源于《理化检验(化学分册)》期刊2015年12期）
卞伟栋[10]（2015）在《气相色谱法测定环境空气中氯乙醇》一文中研究指出建立了用蒸馏水吸收样品后直接进气相色谱仪,经DB-624毛细管柱分离,氢火焰离子化检测器测定环境空气中氯乙醇的方法。该方法氯乙醇加标回收率为94.4%~104.2%,,当采样体积为60L,氯乙醇最低检出质量浓度为0.03mg/m3。该方法前处理简便,分析灵敏度高,能满足环境分析要求。(本文来源于《污染防治技术》期刊2015年05期）
氯乙醇论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)/环磷酸腺苷(cAMP)/cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)信号通路在2-氯乙醇上调星形胶质细胞(AS)表达水通道蛋白-4(AQP4)中的作用。方法①取对数生长期的AS予剂量为0.0、7.5、15.0和30.0 mmol/L 2-氯乙醇(设为相应剂量组)刺激12 h后,收集细胞进行检测。②取对数生长期的AS为空白对照组、抑制剂(MK-801或H89)对照组、2-氯乙醇组、抑制剂(MK-801或H89)干预组。空白对照组不予任何处理;抑制剂对照组仅予浓度为10.0μmmol/L MK-801或15.0μmmol/L H89处理;MK-801干预组以浓度为10.0μmmol/L的MK-801提前干预30 min,H89干预组以浓度为15.0μmmol/L的H89提前干预1 h;干预结束后,2-氯乙醇组和MK-801、H89干预组AS均予浓度为30.0 mmol/L的2-氯乙醇刺激12 h。③收集各组AS,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应法检测AS内AQP4、NMDAR受体主亚基(NR1)、NMDAR受体2B亚基(NR2B)、钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的蛋白和mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法检测磷酸化CaMKⅡ(p-CaMKⅡ)和PKA的表达;采用比色法检测AS内钙离子(Ca~(2+))浓度,采用酶联吸附试验检测腺苷酸环化酶(AC)活力和cAMP水平。结果①30.0 mmol/L剂量组AS内AQP4、NR1、NR2B的蛋白与mRNA,PKA蛋白、CaMKⅡmRNA的相对表达水平以及p-CaMKⅡ/CaMKⅡ蛋白比值、Ca~(2+)浓度、AC活力、cAMP水平均高于0.0 mmol/L剂量组(P<0.05)。PKA蛋白相对表达水平和Ca~(2+)浓度均随着2-氯乙醇剂量的增加而增加(P<0.05)。②2-氯乙醇组AS内AQP4蛋白相对表达水平、Ca~(2+)浓度均高于空白对照组和MK-801对照组(P<0.05),MK-801干预组AS内AQP4蛋白相对表达水平和Ca~(2+)浓度均低于2-氯乙醇组(P<0.05);2-氯乙醇组AS内AQP4和PKA蛋白相对表达水平均高于空白对照组和H89对照组(P<0.05),H89干预组AS内AQP4和PKA蛋白相对表达水平均低于2-氯乙醇组(P<0.05)。结论 2-氯乙醇可通过激活NMDAR/cAMP/PKA信号通路诱导AS中AQP4的表达增强。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
氯乙醇论文参考文献
[1].王彤.p38MAPK信号通路在2-氯乙醇致星形胶质细胞上调MMP-9表达中作用的研究[D].中国医科大学.2019
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