论文摘要
目的通过酵母双杂交筛选技术从猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)c DNA文库中筛选与猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白互作的宿主细胞蛋白。方法将PRRSV 2b基因扩增产物克隆至p GBKT7质粒上,构建重组钓饵载体p GBKT7-2b,转化至Y2H Gold酵母感受态中制备钓饵菌株后,进行自激活和毒性检测;将PAM c DNA文库菌株与钓饵菌株进行杂交融合,经DDO/X/A平板筛选后,对筛选的菌株进行PCR鉴定及测序分析。结果构建的钓饵菌株无毒性和自激活现象;共获得LGALS1、RPL12、LGALS3和RPS20 4种蛋白。结论成功构建了可用于双杂交筛选的钓饵菌株,筛选出4种与PRRSV 2b蛋白互作的PAM蛋白,其中LGALS1出现概率最高。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 崔一龙,邓守全,杨达汉,薛江东,马德慧
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒,蛋白,互作蛋白,猪肺泡巨噬细胞
来源: 中国生物制品学杂志 2019年04期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学,农业科技
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 内蒙古民族大学动物科学与技术学院,内蒙古自治区肉牛疾病防控工程技术研究中心
基金: 国家自然科学基金资助项目(31460662),内蒙古自治区自然科学基金项目(2017MS0319)
分类号: S852.651
DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002560
页码: 403-407
总页数: 5
文件大小: 376K
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标签:猪繁殖与呼吸综合征病毒论文; 蛋白论文; 互作蛋白论文; 猪肺泡巨噬细胞论文;