靶向EGFR二聚化界面单链抗体的构建及表达

论文摘要

[目的]构建靶向EGFR二聚化界面的单链抗体。[方法]构建单链抗体的基因并进行密码子优化,克隆于表达载体p GAPZα-A和毕赤酵母X-33。镍柱纯化目的蛋白,并对EGFR高表达细胞A431和EGFR正常表达细胞NIH-3T3进行体外抑制分析和抗磷酸化分析。[结果]纯化获得了分子量大小约29. 0 k Da的EGFR dimer Sc Fv蛋白。在48h体外抑制实验中,534 nmol/L EGFR dimer Sc Fv对A431和NIH-3T3的抑制率分别为34. 92±1. 30%和5. 89±0.46%,抑制作用与母本抗体相似。Western Blotting分析表明,EGFR dimer Sc Fv能显著抑制A431细胞EGFR磷酸化,而对NIH-3T3细胞显著无抑制作用。[结论]初步验证了靶向EGFR二聚化界面的单链抗体作为新型抗体药物的可行性,为后续研究奠定了基础。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李泽民,赵林,邓栩文,祝贺,邱创楠,温碧燕,刘梦苗,李黄金

关键词: 表皮生长因子受体,二聚化界面,单链抗体,肿瘤

来源: 生物技术 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 广东药科大学生命科学与生物制药学院广东省生物技术候选药物重点实验室

基金: 国家自然科学基金项目(81273423),广东省科技计划项目(2014A020210027),广东省自然科学基金项目(A2015230),广东高校省级重大科研项目(2016KZDXM042)

分类号: Q786

DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.02.0022

页码: 122-126+198

总页数: 6

文件大小: 275K

下载量: 117

相关论文文献

• [1].单链抗体的开发与应用[J]. 天水师范学院学报 2018(05)
• [2].单链抗体的研究进展及其应用[J]. 黑龙江畜牧兽医 2015(13)
• [3].鸡源抗血清4型Ⅰ群禽腺病毒单链抗体文库构建及筛选[J]. 中国兽医学报 2020(01)
• [4].抗克百威单链抗体的可溶性表达载体的构建及鉴定[J]. 食品工业科技 2015(16)
• [5].鼠源抗烟曲霉单链抗体库制备及鉴定[J]. 中国公共卫生 2016(11)
• [6].西维因单链抗体同源建模及与西维因对接模拟研究[J]. 现代食品科技 2014(06)
• [7].人源抗胃癌单链抗体的构建及初步鉴定[J]. 现代医院 2012(10)
• [8].高亲和力抗藻毒素单链抗体的快速筛选[J]. 中国食品学报 2017(10)
• [9].抗血管内皮生长因子受体2双价单链抗体的构建表达及其活性研究[J]. 中国生物工程杂志 2011(08)
• [10].猪蛔虫卵可溶性抗原单链抗体库的构建及初步筛选[J]. 贵州农业科学 2011(12)
• [11].人源性抗丙型肝炎病毒核糖体展示单链抗体库的构建[J]. 解放军医学杂志 2010(03)
• [12].“基于基因工程单链抗体的植物抗病改良研究”通过福建省科技成果验收[J]. 农药市场信息 2014(07)
• [13].单链抗体在兽医上的应用前景[J]. 兽医导刊 2010(12)
• [14].人源化抗PSMA单链抗体的筛选与鉴定[J]. 吉林医药学院学报 2019(03)
• [15].抗大豆胰蛋白酶抑制剂单链抗体表达与纯化方法优化[J]. 生物技术 2016(03)
• [16].抗克伦特罗单链抗体表达载体的构建与鉴定[J]. 生物工程学报 2008(08)
• [17].血管内皮生长因子单链抗体在大肠埃希菌中的高效表达[J]. 微生物学杂志 2019(02)
• [18].抗胰岛素样生长因子1受体单链抗体复性研究[J]. 生物技术 2018(05)
• [19].抗A型产气荚膜梭菌α毒素全人源双价单链抗体的构建、表达及其活性的初步研究[J]. 中国生物工程杂志 2017(04)
• [20].高亲和力抗膀胱癌单链抗体筛选及亲和力测定[J]. 甘肃科学学报 2009(02)
• [21].一株针对人EGFR的单链抗体克隆与哺乳细胞表达[J]. 中国生物工程杂志 2018(05)
• [22].单链抗体对猪流行性腹泻病毒感染仔猪腹泻保护作用初步研究[J]. 猪业科学 2018(06)
• [23].日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用[J]. 生物化学与生物物理进展 2008(08)
• [24].二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体的构建[J]. 食品科学 2010(21)
• [25].基因工程单链抗体的研究进展及临床应用[J]. 中国动物保健 2008(06)
• [26].噬菌体展示全人源抗GPC3的单链抗体的筛选及鉴定[J]. 药学学报 2017(12)
• [27].单链抗体表达研究进展[J]. 实用医学杂志 2009(02)
• [28].基于噬菌体展示技术抗黄曲霉毒素B1单链抗体的筛选及其蛋白结构分析[J]. 中国生物工程杂志 2018(12)
• [29].抗犬细小病毒单链抗体库构建及其亲和力检测[J]. 东北农业大学学报 2017(11)
• [30].抗EGFRvⅢ单链抗体的原核表达条件的优化及纯化[J]. 基因组学与应用生物学 2018(07)

标签：表皮生长因子受体论文;  二聚化界面论文;  单链抗体论文;  肿瘤论文;