水稻细条斑病菌论文_吴晓静

导读:本文包含了水稻细条斑病菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细条,病菌,水稻,缺失,绿茶,生化,片段。

水稻细条斑病菌论文文献综述

吴晓静^[1]（2007）在《水稻细条斑病菌harpin蛋白HpaG_（Xooc）与其功能片段的生物效应及对绿茶产量和生化品质的影响》一文中研究指出植物病原细菌产生的harpin类蛋白质可以诱导过敏性细胞死亡(hypersensitive cell death，HCD)，增强植物抗旱性，诱导植物抗病、抗虫，促进植物生长。水稻细条斑病菌HpaG_(Xooc)蛋白质作为harpin蛋白家族的一员，包含两个富含甘氨酸的结构域(glycine-rich motif，GRM)，一个半胱氨酸(cysteine)。GRM是harpin类蛋白共有的特征，而半胱氨酸是其它harpin类蛋白所没有的。分离水稻细条斑病菌HpaG_(Xooc)的不同功能域，我们得到其九种功能片段，分别含有全长中的一段氨基酸序列，如HpaG_(1-94)含有HpaG_(Xooc)的1-94位氨基酸。其中，HpaG_(1-94)、HpaG_(10-42)以及HpaG_(62-138)，在促进作物生长、抗病以及诱导HCD等方面均强于HpaG_(Xooc)。本研究以无活性蛋白(EVP)为对照，研究这叁种功能片段与HpaG_(Xooc)相比，对绿茶(山茶科，荼属)田间产量、生化品质方面的改良作用。实验表明，HpaG_(Xooc)，尤其是HpaG_(1-94)不仅可以促进绿茶新芽萌发、嫩叶生长，增加茶园产量，而且可以提高叶片中儿茶酚的含量，改良绿茶的生化品质。HpaG_(Xooc)、HpaG_(1-94)处理绿茶，与EVP相比，茶园产量分别提高39％、55％，烘培后叶片中儿茶酚含量分别提高64％、72％。expansin基因调节植物细胞生长，茶树查耳酮合酶CsCHS基因调控茶树中儿茶酚的生物合成。RT-PCR和RNA gel blotting结果表明，HpaG_(Xooc)和HpaG_(1-94)可以诱导绿茶叶片中expansin基因和CsCHS基因表达；HpaG_(1-94)的诱导表达水平要明显高于HpaG_(Xooc)。综上所述，绿茶作为一种有药用价值的饮料，对栽培和加工过程的无公害有着严格的要求；HpaG_(Xooc)尤其是其功能片段HpaG_(1-94)，能够有效提高绿茶田间产量、改良其生化品质，因此有望在绿茶安全改良方面发挥作用。(本文来源于《南京农业大学》期刊2007-06-01）

郭晓静^[2]（2004）在《水稻细条斑病菌harpin_（Xooc）蛋白功能域研究》一文中研究指出多种革兰氏阴性植物病原细菌产生的harpins蛋白在植物上都可以诱导过敏反应(HR)和系统获得抗性(SAR)，并可促进植物生长。人们认为这些功能有可能是由harpins分子不同功能域决定的，但尚无实验证据支持这一观点。由水稻细条斑病菌Xanthomonas oryzae pv．oryzicola菌株RS105的hrf2基因编码的harpin_(Xooc)蛋白具有与其它harpins蛋白类似的特征和功能。为了阐明harpins多效性的机制是否取决于分子内部可能存在的功能域，作者构建了一系列harpin_(Xooc)的部分缺失片段，对它们在植物上的生物学效应进行了研究。 1．水稻细条斑病菌harpin_(Xooc)蛋白质编码基因的缺失突变及突变序列的表达本实验获得了水稻细条斑病菌harpin_(Xooc)蛋白质编码基因hrf2的13个部分缺失片段，这些部分缺失片段通过叁种方法获得：一是由专化性引物直接进行PCR获得R1+2，R1，RAC，RBD，RBC，RCD,R2+3，R2，Rp和R3片段共10个；二是由不同片段拼接成新片段如R1+3和R(G)，R1+3由R1和R3拼接后获得：首先在R1引物的上下游分别加上NdeI与DdeI识别碱基，在R3引物两端加上DdeI和KpnI识别碱基。PCR扩增分别得到R1(NdeI／DdeI)和R3(DdeI／KpnI)，两种产物分别用DdeI酶切，回收后用T4连接酶连接，连接产物经过纯化，作为模板用R1的上游引物与R3的下游引物扩增片段R1+3。R(G)相对复杂一些，因为要在保证其它序列不变的情况下，仅缺失两个GGG-GG基序。通过对序列的分析设计叁对引物PCR扩增得到hrf2、Head和Mid片段，得到的叁个片段经过MspI单酶切并胶回收所需的目的小片段，加入T4连接酶，连接酶切回收后的叁个目的小片段，纯化连接产物并作为模板进行PCR，扩增产物即是R(G)片段；叁是利用TaKaRa的定点突变试剂盒获得第45位半胱氨酸(C)突变成苏氨酸(T)的R(mutant)片段。根据hrf2基因序列设计用于引入突变位点的寡核苷酸引物，扩增使第45位半胱氨酸被苏氨酸取代。这13个部分缺失片段被连到含T7启动子的高表达载体pET30a(+)上，构建了重组质粒，并转化宿主菌BL21(DE3)。经IPTG诱导表达后得到harpin_(Xooc)蛋白质的13个缺失片段水稻细条斑病菌harPinXoo。蛋白功能域的研究 ZL一T-SDS一PAGE蛋白电泳检测发现，RI+2，RI，RAC，RBD，RBC，RCD， RI+3，R(o)和R(mutant)在推测位置都出现了目的条带，但RZ+3，咫，Rp和 R3却没有出现目的条带。2. HarPinxoo。蛋白质不同缺失多肤诱导过敏反应和抗病性的能力测定了ha印inlo。。完整分子及上述13个部分缺失片段在烟草和拟南芥上的不同功能，包括HR和诱导植物杭病性等。结果发现harpin:oo。蛋白质引起HR的功能区域主要位于N端第11一50位氛基酸，而且第45位半耽氨酸突变成苏氨酸以及GCC一GG基序的缺失对HR活性没有明显影响。RAC，RCD，RZ，RP，R(G)诱导烟草杭翎v的活性较强。其中缺失多肤RCD和R(G)处理烟草诱导抗真菌的效果相对明显，而RAC、RCD诱导番茄对凡。ud沙功卯as.夕少了动君己己pv.tomato(De3000)的抗性比较明显。实验以RZ+3和RP为代表，检测了一些相关基因的表达，结果表明RZ+3能够诱导包括过敏反应相关基因力s刀夕刀以及信号通路中的调节基因和效应基因的表达，而R3不能引起hs刀0刀表达，但却能诱导调节基因和效应基因的表达。3.HarPinxooc蛋白质不同缺失片段促进生长能力及其机理的初步研究测定了harpinx。。c完整分子及其13个缺失片段Rl+2，Rl，RAC，RBD，RBC，RCD，RZ+3，RZ，Rp，R3，Rl+3，R(G)和R(mutant)在番茄和拟南芥上的促生长功能，包括促进地上部分、地下部分的生长以及增加叶绿素含量的效应。结果发现，部分缺失片段R一+2，Rl，R^C，RCD，RZ+3，Rl+3和R(G)具有较明显的促生作用。实验选取促生作用明显的缺失多肤ha rpinx。。。，RCD，RZ+3和R(G)为代表，检测了一些相关基因的表达，结果表明harpinx。。。，RCD，RZ+3和R(G)都能够诱导由乙烯介导的与生长有关的信号通路上的效应基因PDFI .2和PR一3b的表达。总而言之，13个缺失片段中有些片段具有诱导HR，诱导抗病性以及促进植物生长的功能。然而，实验中发现同一片段可能具有多种不同的功能，不同的片段可能会起到相同的作用。因此，harPinxooc蛋白没有明显的活性中心，各区域在功能上有可能是独特的也有可能是迭加的。(本文来源于《南京农业大学》期刊2004-07-01）

陈功友,张学民,张信娣,潘小玫,王金生^[3]（2000）在《水稻细条斑病菌的化学诱变及hrp基因突变体的功能互补研究》一文中研究指出硫酸二乙酯（DES）化学诱变水稻细条斑病菌（Xanthomonasoryzaepv.oryzicola）RS105获得6株hrp突变体，其在寄主水稻上失去致病性和在非寄主烟草上失去激发过敏反应（hypersensitiveresponse，HR）的能力。将水稻白叶枯病菌（X．oryzaepv．oryzae）日本系统Ⅲ号小种（JXOⅢ）基因文库和RS105基因文库互补RS105hrp突变体M55，分别得到来自JXOⅢ的阳性克隆pUHRX245和来自RS105的阳性克隆pUHRS130、PUHRS138和PUHRS662。所有功能互补子都和野生型菌株RS105一样，能在非寄主烟草上激发HR，但在寄主水稻上，仅有4个互补子M1005／pUHRX245、M1005／pUHRS130、M1005／pUHRS138和M1005／pUHRS662恢复了致病性。生化和细胞组分测定结果表明，RS105、hrp突变体和其功能互补子的胞外酶（淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、纤维素酶和脂酶）活性基本一致，激发非奇主烟草产生HR的信号物质不是LPS，而是harpin类蛋白，hrp突变体M51、M1016和M1098为Ⅲ型泌出通道突变体，hrp突变体M55、M1005和M1198可能为编码和调控harpin类蛋白的突变体。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2000年02期）

水稻细条斑病菌论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

多种革兰氏阴性植物病原细菌产生的harpins蛋白在植物上都可以诱导过敏反应(HR)和系统获得抗性(SAR)，并可促进植物生长。人们认为这些功能有可能是由harpins分子不同功能域决定的，但尚无实验证据支持这一观点。由水稻细条斑病菌Xanthomonas oryzae pv．oryzicola菌株RS105的hrf2基因编码的harpin_(Xooc)蛋白具有与其它harpins蛋白类似的特征和功能。为了阐明harpins多效性的机制是否取决于分子内部可能存在的功能域，作者构建了一系列harpin_(Xooc)的部分缺失片段，对它们在植物上的生物学效应进行了研究。 1．水稻细条斑病菌harpin_(Xooc)蛋白质编码基因的缺失突变及突变序列的表达本实验获得了水稻细条斑病菌harpin_(Xooc)蛋白质编码基因hrf2的13个部分缺失片段，这些部分缺失片段通过叁种方法获得：一是由专化性引物直接进行PCR获得R1+2，R1，RAC，RBD，RBC，RCD,R2+3，R2，Rp和R3片段共10个；二是由不同片段拼接成新片段如R1+3和R(G)，R1+3由R1和R3拼接后获得：首先在R1引物的上下游分别加上NdeI与DdeI识别碱基，在R3引物两端加上DdeI和KpnI识别碱基。PCR扩增分别得到R1(NdeI／DdeI)和R3(DdeI／KpnI)，两种产物分别用DdeI酶切，回收后用T4连接酶连接，连接产物经过纯化，作为模板用R1的上游引物与R3的下游引物扩增片段R1+3。R(G)相对复杂一些，因为要在保证其它序列不变的情况下，仅缺失两个GGG-GG基序。通过对序列的分析设计叁对引物PCR扩增得到hrf2、Head和Mid片段，得到的叁个片段经过MspI单酶切并胶回收所需的目的小片段，加入T4连接酶，连接酶切回收后的叁个目的小片段，纯化连接产物并作为模板进行PCR，扩增产物即是R(G)片段；叁是利用TaKaRa的定点突变试剂盒获得第45位半胱氨酸(C)突变成苏氨酸(T)的R(mutant)片段。根据hrf2基因序列设计用于引入突变位点的寡核苷酸引物，扩增使第45位半胱氨酸被苏氨酸取代。这13个部分缺失片段被连到含T7启动子的高表达载体pET30a(+)上，构建了重组质粒，并转化宿主菌BL21(DE3)。经IPTG诱导表达后得到harpin_(Xooc)蛋白质的13个缺失片段水稻细条斑病菌harPinXoo。蛋白功能域的研究 ZL一T-SDS一PAGE蛋白电泳检测发现，RI+2，RI，RAC，RBD，RBC，RCD， RI+3，R(o)和R(mutant)在推测位置都出现了目的条带，但RZ+3，咫，Rp和 R3却没有出现目的条带。2. HarPinxoo。蛋白质不同缺失多肤诱导过敏反应和抗病性的能力测定了ha印inlo。。完整分子及上述13个部分缺失片段在烟草和拟南芥上的不同功能，包括HR和诱导植物杭病性等。结果发现harpin:oo。蛋白质引起HR的功能区域主要位于N端第11一50位氛基酸，而且第45位半耽氨酸突变成苏氨酸以及GCC一GG基序的缺失对HR活性没有明显影响。RAC，RCD，RZ，RP，R(G)诱导烟草杭翎v的活性较强。其中缺失多肤RCD和R(G)处理烟草诱导抗真菌的效果相对明显，而RAC、RCD诱导番茄对凡。ud沙功卯as.夕少了动君己己pv.tomato(De3000)的抗性比较明显。实验以RZ+3和RP为代表，检测了一些相关基因的表达，结果表明RZ+3能够诱导包括过敏反应相关基因力s刀夕刀以及信号通路中的调节基因和效应基因的表达，而R3不能引起hs刀0刀表达，但却能诱导调节基因和效应基因的表达。3.HarPinxooc蛋白质不同缺失片段促进生长能力及其机理的初步研究测定了harpinx。。c完整分子及其13个缺失片段Rl+2，Rl，RAC，RBD，RBC，RCD，RZ+3，RZ，Rp，R3，Rl+3，R(G)和R(mutant)在番茄和拟南芥上的促生长功能，包括促进地上部分、地下部分的生长以及增加叶绿素含量的效应。结果发现，部分缺失片段R一+2，Rl，R^C，RCD，RZ+3，Rl+3和R(G)具有较明显的促生作用。实验选取促生作用明显的缺失多肤ha rpinx。。。，RCD，RZ+3和R(G)为代表，检测了一些相关基因的表达，结果表明harpinx。。。，RCD，RZ+3和R(G)都能够诱导由乙烯介导的与生长有关的信号通路上的效应基因PDFI .2和PR一3b的表达。总而言之，13个缺失片段中有些片段具有诱导HR，诱导抗病性以及促进植物生长的功能。然而，实验中发现同一片段可能具有多种不同的功能，不同的片段可能会起到相同的作用。因此，harPinxooc蛋白没有明显的活性中心，各区域在功能上有可能是独特的也有可能是迭加的。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。