福建省谱系3 PRRSV的分离及其ORF5基因序列分析

福建省谱系3 PRRSV的分离及其ORF5基因序列分析

论文摘要

对福建省新流行谱系3的PRRSV进行分离,并对其分子生物学特性进行初步研究,为新流行毒株的防治提供依据和参考。分离的毒株通过RT-PCR和IFA对PRRSV分离毒株进行鉴定,并对其ORF5基因进行序列测定分析。结果显示,分离株能够在Marc-145细胞上增殖并产生典型的细胞病变,被抗PRRSV的特异性单克隆抗体所识别,具有特异性免疫荧光,其TCID50为105.3,将其命名为FJFQ1805。分离株ORF5基因与北美型PRRSV参考株核苷酸同源性为83.9%~92.2%,与谱系3病毒株QYYZ的同源性最高,为92.2%。系统进化树分析表明,该分离株属于北美型,与QYYZ、GM2和FJFS等谱系3的病毒株属于同一分支。综上,所分离的FJFQ1805毒株为谱系3的病毒株。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 猪场发病情况及样品采集
  •   1.2 主要试剂 DNA Marker
  •   1.3 引物设计
  •   1.4 病料的处理
  •   1.5 病毒分离
  •   1.6 分离病毒的间接免疫荧光 (IFA) 检测
  •   1.7 TCID50的测定
  •   1.8 分离病毒的ORF5基因的RT-PCR扩增及序列分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 病毒接种细胞
  •   2.2 PRRSV的间接免疫荧光鉴定结果
  •   2.3 RT-PCR扩增结果
  •   2.4 PRRSV分离株TCID50的测定
  •   2.5 ORF5基因及推导氨基酸序列的变异分析
  •   2.6 ORF5基因的遗传进化树分析
  •   2.7 ORF5基因编码的氨基酸序列分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 魏春华,夏伟,李娜,马英,吴熠丹,虞慧云,戴爱玲,杨小燕,刘建奎

    关键词: 谱系,分离鉴定,基因,序列分析

    来源: 中国兽医杂志 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 龙岩学院生命科学学院福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室福建省生猪疫病防控工程技术研究中心

    基金: 福建省科技引导项目(2018N0022),福建省教育厅中青年项目(JAT170571),龙岩学院产学研项目(LC2016010)

    分类号: S852.651

    页码: 20-24+130

    总页数: 6

    文件大小: 1839K

    下载量: 71

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