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幽门螺杆菌毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白表达的影响

论文摘要

目的检测幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白parkin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株（1004Hp△cagA）和野生型Hp/cagA+菌株（1004Hp）感染原代胃癌细胞,感染6h收集细胞蛋白,用高表达cagA的真核表达载体pcDNA3.1/cagA脂质体转染胃癌细胞AGS,24h收集细胞蛋白,用Western blot检测各组细胞线粒体自噬相关蛋白parkin、p62、LC3表达变化。结果 parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在1004 Hp△cagA感染组分别为0.97±0.23、1.71±0.23、1.03±0.14,1004Hp感染组分别为1.61±0.32、2.26±0.08、1.32±0.04,1004Hp感染组较1004Hp△cagA感染组升高了1.66倍、1.32倍、1.27倍,差异有统计学意义（F值分别为7.96、15.35、11.09,P<0.05）;parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在pcDNA3.1空载体转染组分别为1.15±0.14、0.75±0.23、0.74±0.19,pcDNA3.1/cagA转染组分别为1.49±0.02、1.01±0.02、1.29±0.07,pcDNA3.1/cagA转染组较pcDNA3.1空载体转染组升高1.29倍、1.35倍、1.74倍,差异有统计学意义（F值分别为17.48、14.02、21.06,P<0.05）。Hp/cagA+感染和pcDNA3.1/cagA转染取得一致结果,提示Hp cagA注入胃上皮细胞后影响细胞线粒体自噬相关蛋白的表达。结论Hp CagA对线粒体自噬有一定的调控作用,其可能是Hp诱导胃癌发生发展的分子机制。

论文目录

  • 材料与方法
  •   1 材料
  •     1.1 菌株、细胞和载体
  •     1.2 主要试剂
  •   2 方法
  •     2.1 原代胃癌细胞和胃癌细胞AGS的培养
  •     2.2 Hp培养
  •     2.3 1004Hp和1004Hp△cgaA感染原代胃癌细胞
  •     2.4 pcDNA3.1/cagA质粒转染胃癌细胞AGS
  •     2.5 Western blot检测LC3、P62、Parkin蛋白的表达
  •     2.6 统计学分析
  • 结果
  •   1 Hp的培养及鉴定
  •   2 Hp感染对原代胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白表达的影响
  •   3 pcDNA3.1/cagA转染胃癌细胞AGS CagA蛋白的表达
  •   4 pcDNA3.1/cagA转染对AGS细胞中线粒体自噬相关蛋白表达的影响
  • 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 鲍丽雅,黄婷婷,赵艳,李超,陈定宇,王琴容,周建奖,谢渊

    关键词: 胃癌细胞,线粒体自噬,幽门螺杆菌

    来源: 中国病原生物学杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室,贵州医科大学附属医院感染科肝炎实验室,贵州医科大学分子生物学重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(No.31660031,31560326),贵州省科技计划项目黔科合平台人才项目[2017]5652,贵阳市科技计划项目筑科合同项目[(2017)5-16]

    分类号: R735.2

    DOI: 10.13350/j.cjpb.191206

    页码: 1394-1397+1402

    总页数: 5

    文件大小: 910K

    下载量: 30

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/01e89c61d6b184588fc560fa.html