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牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

论文摘要

为了研制一种检测牛布鲁氏菌抗体的间接ELISA试剂盒,试验以提纯的羊布鲁氏菌WS-01株脂多糖（LPS）作为包被抗原,建立牛布鲁氏菌间接ELISA方法。筛选最佳试剂盒组分并优化反应条件,制备牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒,并用该试剂盒对182份布鲁氏菌病阳性血清和143份布鲁氏菌病阴性血清进行检测,检测结果经SPSS17.0软件分析,构建受试者工作曲线（ROC）及曲线下面积,以最高敏感性和特异性确定临界点。使用布病标准阳性血清按2的倍比稀释,采用建立的间接ELISA方法进行检测,得出阳性临界值时的最大稀释倍数。使用本研究建立的间接ELISA试剂盒及国外商品化试剂盒对临床采集的411份样品进行比对检测,比较其符合率。结果表明:当阳性血清稀释到1∶128时,通过建立的间接ELISA检测结果仍为阳性,该方法与其他常见病无交叉反应,重复性检测批间变异系数均小于10%,保存期试验确定试剂盒可在2℃～8℃下保存12个月;选取411份样品进行牛布鲁氏菌检测,本研究建立的试剂盒与国外试剂盒相比符合率为91.24%,说明两种试剂盒符合率较高,为牛布鲁氏菌的临床诊断提供了技术手段。

论文目录

  • 1 材料
  • 2 方法
  •   2.1 脂多糖的提取鉴定
  •   2.2 布鲁氏菌间接ELISA方法的建立
  •   2.3 临界值的确定
  •   2.4 敏感性试验
  •   2.5 特异性试验
  •   2.6 重复性试验
  •   2.7 保存期试验
  •   2.8 与国外试剂盒的比较
  • 3 结果与分析
  •   3.1 脂多糖的提取鉴定
  •   3.2 布鲁氏菌间接ELISA方法的建立
  •   3.3 临界值的确定
  •   3.4 敏感性试验
  •   3.5 特异性检验
  •   3.6 重复性试验
  •   3.7 保存期试验
  •   3.8 与国外商品化试剂盒进行比较
  • 4 讨论与结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 肖妍,李蓉蓉,柴铭骏,霍蕾,董志珍,刘河冰

    关键词: 布鲁氏菌,间接,敏感性,特异性,应用

    来源: 今日畜牧兽医 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 畜牧与动物医学

    单位: 天津海关动植物与食品检测中心,北京维德维康生物技术有限公司

    基金: 天津市科技计划项目（17YFZCNC00290）

    分类号: S858.23

    页码: 6-9

    总页数: 4

    文件大小: 885K

    下载量: 183

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/03804a89600e20a6f8375e44.html