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miR-7704对头颈鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响

论文摘要

目的:探究过表达miR-7704对头颈鳞状细胞癌（HNSCC）细胞生物学行为的影响。方法:应用实时定量RT-PCR检测人角质形成细胞HOK和HNSCC细胞系HN4、HN6、HN13及CAL27中miR-7704表达水平。构建过表达载体miR-7704 mimic转染HN6、CAL27。使用CCK8、平板克隆形成、划痕愈合实验及Transwell侵袭实验检测过表达miR-7704对HN6、CAL27细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。Western blot检测HN6、CAL27细胞过表达miR-7704后上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白及苏氨酸激酶（AKT）信号通路表达。结果:相较HOK,HNSCC细胞系内miR-7704表达量均明显上调（P<0.05）。HN6、CAL27细胞转染过表达载体miR-7704 mimic后,细胞增殖、迁移及侵袭能力增强。Western blot结果显示过表达miR-7704后HN6、CAL27细胞上皮性钙黏附蛋白（E-cadherin）及β-连环蛋白（β-catenin）表达水平下降（P<0.01）,神经性钙黏附蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、Snail蛋白及Slug蛋白表达水平均上调（P<0.01）,AKT及p-AKT蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）。结论:miR-7704可能作为一种促癌因子,通过调控AKT信号通路诱导EMT,从而促进HNSCC细胞生物学行为进程。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要材料和试剂
  •   1.2 细胞培养
  •   1.3 实时定量RT-PCR
  •   1.4 细胞转染
  •   1.5 CCK8实验检测细胞活性
  •   1.6 平板克隆形成实验检测细胞增殖能力
  •   1.7 划痕愈合实验检测细胞迁移能力
  •   1.8 Transwell实验检测细胞侵袭能力
  •   1.9 Western blot检测上皮-间充质转化及AKT通路相关蛋白
  •   1.10 统计学分析
  • 2 结 果
  •   2.1 HNSCC细胞中miR-7704表达量显著升高
  •   2.2 miR-7704 mimic转染效率验证
  •   2.3 过表达miR-7704后HN6、CAL27细胞的增殖能力和克隆形成能力增强
  •   2.4 过表达miR-7704促进HN6、CAL27细胞的迁移和侵袭
  •   2.5 过表达miR-7704促进HN6、CAL27细胞EMT及AKT信号通路表达
  • 3 讨 论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王春笛,郑旸,董一博,宋晓萌,吴煜农

    关键词: 头颈鳞状细胞癌,上皮间充质转化,信号通路

    来源: 口腔生物医学 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科

    基金: 国家自然科学基金(81772887),江苏省医学创新团队资助项目(CXTD2017036),江苏省高校优势学科建设工程(2018-87)

    分类号: R739.91

    页码: 196-200

    总页数: 5

    文件大小: 2344K

    下载量: 84

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/0b488c4d94ef02aa298bc4c6.html