不同酿酒酵母菌株来源异麦芽糖酶IMA1的克隆、表达及表征（英文）

论文摘要

【目的】异麦芽糖酶IMA1在充分利用含有α-1,6-O-糖苷键的低聚糖中起着关键作用。【方法】在本研究中,对来自4株酿酒酵母菌株（包括3株嗜酸性菌株）来源的异麦芽糖酶IMA1进行克隆、表达、纯化和表征。【结果】研究发现,4种异麦芽糖酶IMA1表现出类似的pH和温度依赖性,但表现出不同的动力学参数和热稳定性。IMA1-A对α-MG（α-甲基葡糖苷）表现出最高的结合亲和力、转换数、催化效率和热稳定性。结构和序列分析表明,2个远离活性位点和底物结合位点的氨基酸的差异对异麦芽糖酶IMA1的动力学参数和热稳定性有重要影响。【结论】本研究结果对进一步研究异麦芽糖酶IMA1的结构-功能关系奠定了基础。

论文目录

1 Materials and methods

1.1 Materials

1.2 Bacterial strains, plasmids and media

1.3 DNA manipulations

1.4 Protein over-expression and purification

1.5 Enzyme assay

1.6 Determination of pH-rate profiles, temperature dependence and thermostability

2 Results

2.1 Gene cloning and sequence analysis of isomaltases IMA1

2.2 Expression and purification of isomaltases IMA1

2.3 Comparison of kinetic parameters of isomaltases IMA1

2.4 Comparison of pH-rate profiles of isomaltases IMA1

2.5 Comparison of temperature dependence and themostability of isomaltases IMA1

3 Discussion

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 叶进前,赵勇山,杜昱光,李建军

关键词: 异麦芽糖酶,酿酒酵母,动力学参数,值活性曲线,热稳定性

来源: 微生物学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院,中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室国家生物技术工程研究中心(北京)全军生物药制造和剂型工程重点实验室

基金: Supported by the National Natural Science Foundation of China(31370799)~~

分类号: Q78;Q936

DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20180416

页码: 1354-1362

总页数: 9

文件大小: 905K

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不同酿酒酵母菌株来源异麦芽糖酶IMA1的克隆、表达及表征（英文）

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