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miR-146a-5p在Notch2调控牙周膜干细胞成骨分化机制的作用研究

论文摘要

目的:探索miR-146a-5p在Notch2分子调控牙周膜干细胞向成骨细胞分化中的关键作用,为口腔疾病的治疗及组织工程修复提供基础的理论依据。方法:培养hPDLSCs,采用RT-PCR检测对其成骨诱导前后成骨分化相关基因ALP、OSX及Notch2基因水平、miR-146a-5p的表达变化;通过Western Blot检测hPDLSCs成骨诱导分化后14d成骨相关蛋白ALP、OSX以及Notch 2改变;将miR-146a-5p转染hPDLSCs,通过RT-PCR及Western Blot分别检测成骨相关基因ALP、OSX以及Notch2 mRNA蛋白水平。结果:RT-PCR检测结果表明,hPDLSCs成骨诱导7d、14d,ALP、OSX及Notch 2 mRNA水平表达增高（P<0. 05）,同时在蛋白水平上ALP、OSX、Notch2分子表达增高（P<0. 05）;RT-PCR显示成骨诱导14d,miR-146a-5p表达下降;miR-146a-5p转染h PDLSCs后,成骨相关蛋白ALP、OSX以及Notch2表达降低（P<0. 05）。结论:miR-146a-5p在h PDLSCs向成骨细胞方向分化过程中能够抑制Notch信号通路分子以及成骨相关基因ALP、OSX表达,参与h PDLSCs向成骨细胞方向分化。

论文目录

  • 1. 材料和试剂
  •   1.1 细胞来源
  •   1.2 主要试剂
  • 2. 实验方法
  •   2.1 h PDLSCs培养及成骨诱导分化
  •   2.2 R T-PCR检测h PDLSCs成骨分化过程中成骨相关基因ALP、OSX m RNA水平以及mi R-146a-5p的表达
  •   2.3 Western blot检测h PDLSCs成骨分化过程中成骨相关蛋白ALP、OSX以及Notch2分子的蛋白表达改变
  •   2.4 h PDLSCs过表达miR-146a-5p的构建
  •   2.5 成骨细胞茜素红染色
  •   2.6 统计学方法
  • 3. 结果
  •   3.1 h PDLSCs成骨相关基因ALP、OSX,Notch 2 mRNA水平的改变
  •   3.2 Western blot检测成骨相关蛋白ALP、OSX以及Notch 2分子改变
  •   3.3 RT-PCR检测h PDLSCs成骨分化过程中miR-146a-5p表达改变
  •   3.4 miR-146a-5p过表达后对Notch 2分子以及h PDLSCs的成骨分化的影响
  • 4. 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 苗辉,叶涛,何峰,陈芳,张勉,米磊,于世宾

    关键词: 人牙周膜干细胞,成骨分化

    来源: 口腔颌面修复学杂志 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 口腔科学

    单位: 第四军医大学口腔医院牙周病科,第四军医大学国家口腔疾病临床医学研究中心,第四军医大学口腔医院解剖生理学教研室,陕西省榆林市第一医院口腔科

    基金: 国家自然科学基金面上项目(项目编号：81970953),国家自然科学基金青年项目(项目编号：81700995)

    分类号: R781.4

    DOI: 10.19748/j.cn.kqxf.1009-3761.2019.06.001

    页码: 321-325

    总页数: 5

    文件大小: 242K

    下载量: 77

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/223ef3f136b443b006795385.html