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参苓白术散通过自噬调节脂多糖诱导的肠隐窝上皮细胞通透性变化

论文摘要

目的:探究参苓白术散通过细胞自噬调节脂多糖（LPS）诱导的肠隐窝上皮细胞（IEC-6）通透性变化研究。方法:细胞分组:空白组、LPS（100μg/ml）模型组、LPS+参苓白术散1 g/kg含药血清5%、10%、20%剂量组、胎牛血清（FBS）组及各阻断剂组。Western blotting检测LC3-II/LC3-I、p62、p-Akt、p-4Ebp1、p-p70s6k、p-Ulk1及磷酸化与非磷酸化mTOR蛋白的表达量;罗丹明-鬼笔染色法检测骨架蛋白F-actin的分布;电阻仪检测细胞电阻值。结果:模型组与空白组比较,LC3-II/LC3-I蛋白比值明显降低,信号通路蛋白mTOR、pho-mTOR、p-4Ebp1表达量上调,p-p70s6k、p-Ulk1表达下调,P-P62/P62、P-AKT/AKT比值升高。肌动蛋白丝出现紊乱、拉长,且F-actin量明显变少,TEER值明显下降;与模型组比较,参苓白术散各含药血清组LC3-II/LC3-I蛋白比值明显升高。信号通路相关蛋白mTOR、pho-mTOR、p-4Ebp1表达明显下调,p-p70s6k、p-Ulk1蛋白表达量明显上调,P-P62/P62、P-AKT/AKT比值明显降低,F-actin排列紧密,蛋白量明显增多,TEER值明显增加。结论:参苓白术散1 g/kg含药血清组能通过调控自噬相关通路促进IEC-6细胞自噬蛋白表达,同时改变IEC-6细胞骨架蛋白F-actin,减小细胞通透性,而这一过程与调控自噬相关通路PI3K/AKT/mTOR有关。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验药物
  •   1.2 动物
  •   1.3 试剂
  •   1.4 仪器
  •   1.5 方法
  •     1.5.1 含药血清的制备
  •     1.5.2 细胞分组造模
  •     1.5.3 Western blot检测
  •     1.5.4 罗丹明-鬼笔染色法检测细胞骨架蛋白F-actin
  •     1.5.5 TEER实验
  • 2 结果
  •   2.1 参苓白术散对C3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P-P70S6、磷酸化及非磷酸化mTOR蛋白相对表达量的影响
  •   2.2 参苓白术散对P-4EBP1、P-P62/P62、P-AKT、P-ULK1蛋白相对表达量的影响
  •   2.3 IEC-6细胞F-actin分布
  •   2.4 IEC-6细胞跨细胞单层电阻值
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘玉晖,徐伟,曾兰芳,游宇

    关键词: 参苓白术散,肠隐窝上皮细胞,脂多糖,细胞自噬,骨架蛋白,细胞通透性

    来源: 中药药理与临床 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 江西中医药大学药学院,南昌大学第一附属医院消化内科

    基金: 国家自然科学基金项目(81460627,81860731)

    分类号: R285.5

    DOI: 10.13412/j.cnki.zyyl.2019.06.002

    页码: 7-10

    总页数: 4

    文件大小: 1203K

    下载量: 162

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/23fe186c8cfd88d278361caf.html