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白藜芦醇通过保护线粒体功能延缓骨髓间充质干细胞衰老

论文摘要

目的:探讨白藜芦醇对骨髓间充质干细胞（MSC）衰老的影响及其机制。方法:分离SD乳鼠（7日龄）MSC,传代培养至第3代后检测0、1、10、50 g/L D-半乳糖对MSC衰老的影响,确定D-半乳糖诱导MSC衰老的最佳浓度。再将细胞随机分为10、50、100μmol/L白藜芦醇组及对照组。衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色观察各组细胞衰老变化;DCFH-DA染色检测总活性氧水平;MitoSOX Red染色检测线粒体活性氧水平;线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1法）检测线粒体膜电位变化;纯化线粒体膜通道孔（mPTP）比色法检测线粒体膜通道开放水平;蛋白质印迹法检测衰老相关蛋白p53、p16、γ-H2AX表达和细胞质内线粒体细胞色素C外泄水平。结果:10、50 g/L D-半乳糖可明显增加SA-β-gal染色阳性MSC数量和线粒体活性氧水平（均P<0.01）。与对照组比较,白藜芦醇组SA-β-gal染色阳性细胞数减少（均P<0.01）,p53、p16和γ-H2AX表达减少,细胞内总活性氧和线粒体活性氧水平下降（均P<0.01）,线粒体膜电位下降（P<0.05或P<0.01）,膜通道开放水平降低（P<0.05或P<0.01）,细胞质内细胞色素C外泄减少。结论:白藜芦醇可保护MSC线粒体功能,延缓MSC衰老。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 动物和试剂
  •   1.2 MSC体外培养及分组
  •   1.3 SA-β-gal染色法观察细胞衰老变化
  •   1.4 DCFH-DA和MitoSOX Red染色检测总活性氧和线粒体活性氧
  •   1.5 JC-1法检测线粒体膜电位变化
  •   1.6 mPTP比色法检测线粒体膜通道开放程度
  •   1.7 蛋白质印迹法检测衰老相关蛋白表达和细胞质内线粒体细胞色素C外泄水平
  •   1.8 统计学方法
  • 2 结 果
  •   2.1 D-半乳糖诱导MSC衰老的最佳浓度
  •   2.2 白藜芦醇处理浓度和处理时间对MSC衰老的影响
  •   2.3 白藜芦醇减少衰老相关蛋白p53、p16、γ-H2AX表达
  •   2.4 白藜芦醇降低MSC内和线粒体内活性氧水平
  •   2.5 白藜芦醇保护MSC膜电位降低
  •   2.6 白藜芦醇减少线粒体膜通道开放水平
  •   2.7 白藜芦醇降低线粒体细胞色素C外泄水平
  • 3 讨 论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张大勇,林九洲,王雅艳,许珊,罗成专,蔡佳烨,蒋学范,潘建平

    关键词: 白藜芦醇,骨髓细胞,间质干细胞,线粒体,衰老,细胞,培养的

    来源: 浙江大学学报(医学版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 浙江大学城市学院医学院,浙江省人民医院耳鼻喉科

    基金: 浙江省自然科学基金(Y17H250001),国家自然科学基金(81671613),浙江省医药卫生科研计划(2016KYB024),浙江省中医药科学研究基金(2016ZA024),浙江省公益技术应用研究(实验动物)计划项目(LGD19C070001),杭州市农业与社会发展科研项目(20180533B30)

    分类号: R285.5

    页码: 617-624

    总页数: 8

    文件大小: 1703K

    下载量: 286

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/27ddc7f7afbf8cfc3abc5527.html