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猪源牛病毒性腹泻病毒JLS-01株的分离鉴定及致病性研究

论文摘要

为了解猪源牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）的分子特征及致病性,本研究利用RT-PCR从吉林省某猪场出现严重腹泻症状的仔猪病料中检测到BVDV核酸阳性,将处理后的BVDV阳性样品接种于MDBK细胞,分离到1株病毒,命名为BVDV JLS-01。通过免疫荧光检测、5′UTR与Npro RT-PCR扩增对其分子进化特征进行分析。结果显示,该分离毒株在MDBK细胞上盲传至8代未出现细胞病变,在免疫荧光试验中呈阳性荧光信号。RT-PCR扩增获得大小分别为280和735bp的5′UTR和Npro片段。BVDV JLS-01株5′UTR与Npro序列遗传进化分析表明,其与LN-1和ZM-95亲缘性最近,与牛源毒株LN-1基因同源性达99.3%,提示该毒株可能来源于牛源毒株。将BVDV JLS-01株F8代细胞培养液人工感染BVDV和猪瘟病毒（CSFV）抗体阴性猪,感染猪未表现出明显的体温升高,但白细胞数量下降,并在感染猪的白细胞提取物中分离到该毒株,表明该毒株具有一定的致病性。该毒株的成功分离对进一步开展BVDV流行病学调查及致病机理等方面的研究具有重要意义。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 病料及细胞系
  •     1.1.2 主要试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 病毒分离培养
  •     1.2.2 病毒鉴定
  •       1.2.2. 1 RT-PCR鉴定
  •       1.2.2. 2 免疫荧光鉴定
  •     1.2.3 分离株遗传进化分析
  •     1.2.4 动物回归试验
  • 2 结果
  •   2.1 病毒分离及RT-PCR鉴定结果
  •   2.2 免疫荧光鉴定
  •   2.3 基因分型及遗传进化分析
  •   2.4 动物回归试验
  • 3 讨论
  • 4 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张淑琴,谭斌,刘泽余,王超,郭利,孙娜,程世鹏

    关键词: 猪源牛病毒性腹泻病毒,进化分析,分离鉴定,致病性

    来源: 中国畜牧兽医 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院特产研究所农业部经济动物疫病重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(31602093),基本科研业务费(1610342018004)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.02.027

    页码: 557-564

    总页数: 8

    文件大小: 419K

    下载量: 143

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/2cb04c55336d602c6c446061.html