Print

超快速液相色谱法测定大鼠肝细胞中腺苷酸含量

论文摘要

目的建立大鼠肝细胞中3种腺苷酸[三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）和一磷酸腺苷（AMP）]的超快速液相色谱测定法。方法制备3种腺苷酸混合标准工作液,同时将BRL大鼠肝细胞样品经超声波破碎仪处理提取目标化合物。液相色谱条件:色谱柱为Poroshell 120 SB-AQ C18（100 mm×3. 0 mm,2. 7μm）,流动相为20 mmol/L磷酸氢二钠+20 mmol/L磷酸二氢钠缓冲溶液,流速为0. 20 mL/min,柱箱温度为30℃,二极管阵列检测器光谱扫描范围为190～800 nm,定量波长为259 nm,进样量为5μL。同时对方法的线性范围、稳定性、重复性及准确性进行验证。结果色谱柱对标准品和待检样品的3种腺苷酸组分分离状况良好,样品目标峰位无杂峰干扰,色谱分离在15 min内完成。各目标组分在10～100μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,检测限在0. 652～0. 793μg/mL之间;样品提取液于不同时间点进样所得ATP、ADP和AMP的峰面积RSD分别为2. 06%、1. 15%和1. 26%;6份平行样品在同一检测流程下所得的ATP、ADP和AMP峰面积的RSD分别为2. 13%、2. 04%和1. 89%;样品各组分平均回收率在97. 05%～102. 58%之间,RSD在2. 16%～2. 55%之间。结论建立了大鼠肝细胞中3种腺苷酸含量的超快速液相色谱测定法,且具有良好的线性、稳定性、重复性及准确性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞
  •   1.2 主要试剂及仪器
  •   1.3 溶液的配制
  •   1.4 样品前处理
  •   1.5 液相色谱条件
  •   1.6 检测系统的优化
  •   1.7 方法的验证
  •     1.7.1 线性范围及检测线
  •     1.7.2稳定性
  •     1.7.3 重复性
  •     1.7.4 准确性
  •   1.8 方法的初步应用
  •   1.9 数据处理
  • 2 结果
  •   2.1 检测系统的优化
  •   2.2 方法的验证
  •     2.2.1 线性范围及检测限
  •     2.2.2 稳定性
  •     2.2.3 重复性
  •     2.2.4 准确度
  •   2.3 方法的初步应用
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 贾鹏禹,孙蕊,李良玉,韩毅强,周行,冯乃杰

    关键词: 超快速液相色谱法,腺苷酸,肝细胞,大鼠

    来源: 中国生物制品学杂志 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 黑龙江八一农垦大学

    基金: 黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划(UNPYSCT-2018086),大庆市指导性科技计划(zd-2017-34),黑龙江八一农垦大学“校内培育课题资助计划”(XZR2015-15)

    分类号: Q95-33

    DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002840

    页码: 1138-1142

    总页数: 5

    文件大小: 195K

    下载量: 58

    相关论文文献

    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/30c6c7c752208d2a23b0abd9.html