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基于磁分离方法的猪胰岛素受体分离与活性分析

论文摘要

目前,胰岛素受体的分离提取方法为凝集素亲和层析与以胰岛素作为配体的亲和层析。建立磁分离法,采用胰岛素受体亲和磁分离探针提取受体蛋白,对提取条件进行优化,并以免疫印迹法检测胰岛素作用下受体蛋白酪氨酸的自磷酸化反应。结果表明,磁分离探针与粗提取总蛋白孵育16 h是提取受体蛋白的较优条件,所得胰岛素受体保持了其生物活性,能够发生自磷酸化反应。这些结果表明磁分离方法可应用于胰岛素受体的分离纯化,该方法简便、特异性强、稳定、可靠,为胰岛素信号传导、糖尿病病理、药物筛选等研究提供了有效的研究工具。

论文目录

  • 1 实验部分
  •   1.1 主要仪器与试剂
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 磁球的前处理
  •     1.2.2 磁分离探针的制备
  •     1.2.3 细胞膜上胰岛素受体的初步提取分离
  •     1.2.4 胰岛素受体的磁分离
  •     1.2.5 蛋白质浓度的测定
  •     1.2.6 胰岛素受体的自磷酸化检测
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 磁分离探针的制备
  •   2.2 受体的磁分离纯化
  •   2.3 胰岛素受体活性测定
  • 3 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 钟王磊,陈维娴,周国华

    关键词: 胰岛素受体,磁分离,提取,信号传导,自磷酸化

    来源: 化学试剂 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,化学

    单位: 岭南师范学院生命科学与技术学院,岭南师范学院化学化工学院清洁能源材料化学广东普通高校重点实验室

    基金: 国家自然科学基金资助项目(21605074),广东省自然科学基金资助项目(2014A030310274),稀土资源利用与发光材料研究创新团队项目(2017KCXTD022),岭南师范学院自然科学基金资助项目(ZL1404)

    分类号: Q51;O652.6

    DOI: 10.13822/j.cnki.hxsj.2019006773

    页码: 982-986

    总页数: 5

    文件大小: 171K

    下载量: 94

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/368aa2e170f810851194e2b9.html