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多花兰实时荧光定量PCR内参基因的筛选

论文摘要

多花兰(Cymbidium floribundum)为兰科(Orchidaceae)兰属(Cymbidium)多年生草本植物,具有极高观赏价值。本研究以多花兰的营养器官(根,假鳞茎,叶片)和花器官(萼片,捧瓣,唇瓣和合蕊柱)为材料,使用实时荧光定量PCR技术对5个备选内参基因(18SrRNA, 28SrRNA, Actin, GAPDH和25SrRNA)进行扩增,结合NormFinder、geNorm和Bestkeeper这3个软件分析各内参基因的稳定性,筛选出合适的内参基因。结果显示,在多花兰营养器官和花器官中不同内参基因表达稳定性有一定差别,综合3个软件的分析结果表明多花兰的花器官和营养器官最合适内参基因分别是GAPDH和28SrRNA。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 多花兰RNA结果分析
  •   1.2 候选内参基因引物分析
  •   1.3 候选内参基因的表达丰度分析
  •   1.4 候选内参基因的表达稳定性分析
  •     1.4.1 利用NormFinder软件分析内参基因的稳定性
  •     1.4.2 利用geNorm软件分析内参基因的稳定性
  •     1.4.3 利用Bestkeeper软件分析内参基因的稳定性
  •     1.4.4 多花兰内参基因表达稳定性综合排名分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 材料
  •   3.2 多花兰总RNA提取和cDNA合成
  •   3.3 引物设计和标准曲线制作
  •   3.4 内参基因的qRT-PCR扩增和数据分析
  • 作者贡献

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张玥,陈娟,谢泰祥,陈明堃,周杰,艾叶

    关键词: 多花兰,内参基因,实时荧光定量

    来源: 分子植物育种 2019年24期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 园艺

    单位: 福建农林大学园林学院兰科植物保护与利用国家林业与草原局重点实验室

    基金: 福建省自然科学基金项目(2016J01703),国家自然科学基金项目(31700618),福建省种业创新与产业化工程项目(ZYCX-LY-2017005),福建农林大学创新项目(KFA17331A)共同资助

    分类号: S682.31

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.008163

    页码: 8163-8169

    总页数: 7

    文件大小: 1059K

    下载量: 330

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/4360407a5c06ff941e5c3f6e.html