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DMSO联合神经营养因子BDNF诱导BMSCs向神经样细胞分化

论文摘要

目的:探讨脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）联合二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）诱导骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）向神经样细胞分化的效果,初步检测miRNA-26a在神经细胞分化过程中的表达量变化。方法:从大鼠股骨抽取骨髓分离BMSCs,DMSO对其预诱导,随后用含BDNF的神经细胞培养基培养BMSCs,诱导其分化为神经细胞。免疫组化鉴定分化神经元样细胞特异标记物:神经元特异烯醇酶（neuron specific enolase,NSE）。实时定量PCR法检测神经分化前后酪氨酸磷酸酶蛋白（tyrosine phosphatase protein,PTEN）基因/mTOR和miRNA-26a的表达变化。结果:100 ng·mL-1 BDNF联合3%DMSO可诱导BMSCs向神经元样细胞分化,分化后神经细胞标志物NSE蛋白表达呈阳性,且神经分化过程中miRNA-26a、PTEN/mTOR的含量明显上调。结论:3%DMSO和100 ng·mL-1BDNF的混合诱导剂可诱导大鼠BMSCs向神经元样细胞分化,而miRNA-26a可能通过PTEN/mTOR调节神经分化。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 实验动物
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 BMSCs的获取及纯度检测
  •     1.2.2 BDNF/DMSO联合诱导BMSCs的分化
  •     1.2.3 BMSCs神经分化的鉴定
  •       1.2.3. 1 形态鉴定
  •       1.2.3. 2 免疫组化检测各组神经元特异性烯醇酶（neuron specific enolase,NSE）蛋白的表达
  •     1.2.4 实时荧光定量PCR检测miRNA-26a、PTEN、mTOR的表达变化
  • 2 结果
  •   2.1 诱导前后大鼠BMSCs细胞的形态变化
  •   2.2 免疫细胞组化对BMSCs分化的鉴定
  •   2.3 实时荧光定量PCR对诱导前后miRNA-26a、PTEN、mTOR表达量的检测
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 倪爽,苗泽远,王家昕,王晓霞,李洁,王子钰,魏会平,董明纲,苏立宁

    关键词: 脑源性神经营养因子,二甲基亚砜,骨髓间充质干细胞,神经分化

    来源: 神经药理学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 河北北方学院基础医学院,河北北方学院基础医学院生物教研室,河北北方学院学报编辑部

    基金: 2018年国家级大学生创新创业训练计划项目(No.201810092001),河北北方学院青年基金项目(No.QN2018022)

    分类号: R329.2

    页码: 5-9+16

    总页数: 6

    文件大小: 2510K

    下载量: 24

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/46b9e83438e1c86b7c96b534.html