筛选GPAT基因的酵母遗传互补体系的优化

论文摘要

3-磷酸甘油酰基转移酶（glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT）是甘油脂生物合成途径中催化第1步酰化反应的关键酶,参与生物体的不同代谢途径,发挥着不同的生理功能。本研究对已构建的GPAT基因酵母遗传互补筛选体系进行优化,通过替换酵母表达载体pYES2-Kan-yADH1 v1中ADH1启动子,增强目的基因的表达;同时,在酵母遗传转化后对菌株进行复苏培养,提高遗传转化效率,增加阳性菌落数目。该体系的优化将进一步提高GPAT酶的筛选效率。

论文目录

1 材料与方法

1.1 704 bp ADH1启动子的PCR扩增

1.2 重组酵母表达载体的构建

1.3 2种ADH1启动子对目的基因表达的效果比较

1.4 验证ZAFU1中的At5g06090基因

2 结果与分析

2.1 704 bp ADH1启动子的获得

2.2 At5g06090-yADH1-Kan-pYES2 v2载体的双酶切鉴定

2.3 2种ADH1启动子对目的基因表达的效果比较

2.4 验证ZAFU1中的At5g06090基因

3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈丹丹,刘宏波

关键词: 磷酸甘油酰基转移酶,启动子,酵母,遗传互补

来源: 江苏农业科学 2019年13期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 浙江农林大学农业与食品科学学院

基金: 国家自然科学基金面上项目(编号:31370287),农业部“948”项目(编号:2014-Z30)

分类号: Q78

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.13.017

页码: 64-66

总页数: 3

文件大小: 559K

下载量: 72

筛选GPAT基因的酵母遗传互补体系的优化

论文摘要

论文目录

文章来源

相关论文文献