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奥曲肽偶联的壳聚糖纳米运输分子信标成像肺癌细胞的研究

论文摘要

目的设计并合成奥曲肽（OCT）偶联的壳聚糖（CS）分子信标（MB）纳米（CS-MB-OCT）,研究CS-MB-OCT作为miR-155 MB载体识别miR-155并更好地成像肺癌细胞。方法免疫荧光检测肺癌细胞生长抑素受体2（SSTR2）的表达,以戊二醛为交联剂共价连接CS和OCT中的氨基并合成CS-MB-OCT,检测其吸收光谱、粒径等理化性质。激光共聚焦检测CS-MB-OCT作为miR-155 MB载体对肺癌细胞中miR-155的识别功能并成像肺癌细胞;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）进行验证,并通过荧光信号强度比较CS-MB及CS-MB-OCT的成像功能差别。结果免疫荧光检测发现,SSTR2在肺癌细胞中表达,可和OCT特异性结合。按质量比为4:7合成的CS-MB-OCT,其连接率高,平均纳米粒径（83.41±0.95）nm,粒径范围40-140 nm,适合基因转染。荧光成像表明,OCT偶联的CS-MB-OCT能和肿瘤细胞表面的SSTR2特异性结合,促使更多的MB对肺癌细胞中miR-155识别并成像肺癌细胞,和非偶联OCT的CS-MB组相比,孵育时间更短（仅需1 h）,荧光信号更强（P<0.05）,荧光信号强弱趋势与实时qRT-PCR检测的miR-155表达趋势较一致。结论合成的CS-MB-OCT纳米能和SSTR2特异性结合,更好地对miR-155进行识别并成像肺癌细胞,为肺癌的早期诊断提供了新方法。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1 .1 材料
  •     1 .1.1 细胞系
  •     1 .1.2 试剂与抗体
  •   1 .2 方法
  •     1 .2.1 细胞培养
  •     1 .2.2 免疫荧光检测SSTR2的表达
  •     1 .2.3 合适质量比的CS-MB-OCT合成
  •     1 .2.4 CS-MB-OCT纳米物理性质检测
  •     1 .2.5 CS-MB-OCT对肺癌细胞miR-155的识别成像功能检测及荧光强度分析
  •     1 .2.6 qRT-PCR检测miR-155的表达
  •   1 .3 统计学分析
  • 2结果
  •   2.1 SSTR2的表达
  •   2.2 CS-MB-OCT连接率及吸收光谱检测
  •   2.3 CS-MB纳米粒度分析检测
  •   2.4激光共聚焦检测CS-MB-OCT对miR-155的识别成像功能
  •   2.5 CS-MB-OCT转染miR-155 MB后荧光强度分析及qRT-PCR验证
  • 3讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 朱海振,郭熠,罗青,陈光朋,张红丽,吴小亮,黄立敏,陈正堂

    关键词: 肺肿瘤,纳米壳聚糖,分子信标,生长抑素受体,奥曲肽

    来源: 军事医学 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 贵州省人民医院肿瘤科贵州省癌症中心,贵阳市护理职业技术学院,陆军军医大学附属新桥医院全军肿瘤研究所

    基金: 国家自然科学基金面上项目(81071786),贵州省科技厅联合基金(黔科合LH字【2016】7196),贵州省卫生计生委项目(gzwjkj2017-1-002),贵州省高层次创新型人才计划

    分类号: R734.2

    页码: 680-685

    总页数: 6

    文件大小: 2107K

    下载量: 36

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/4d17ba696908e872f7b387d9.html