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调控黑曲霉葡萄糖转运系统增强柠檬酸的合成

论文摘要

柠檬酸是目前世界上需求量最大的有机酸,年产量达到170万吨,主要由黑曲霉进行深层有氧发酵来生产。强化葡萄糖的吸收是增强柠檬酸合成的重要策略。对黑曲霉基因组中预测到的葡萄糖转运蛋白进行进化树分析和多序列比对,鉴定到与Kl HGT1亲缘关系较近的高亲和力葡萄糖转运蛋白基因,其编码的蛋白质序列含11个跨膜区,命名为An HGT1。在葡萄糖限制性培养基上进行生长测定,发现HGT1转化子的菌落直径比H915-1增加了50%～150%。通过在发酵后期添加30 g/L葡萄糖,发现HGT1的葡萄糖消耗速率比H915-1快12 h。最终HGT1转化子的柠檬酸产量比野生型菌株H915-1增加14.7%,发酵时间减少6 h,最大比产酸速率增加了29.5%。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株和培养基
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 表达载体的构建
  •     1.2.2 进化树分析
  •     1.2.3 跨膜区域预测
  •     1.2.4 黑曲霉H915-1的转化
  •     1.2.5 黑曲霉H915-1的柠檬酸摇瓶发酵
  •     1.2.6 HPLC检测有机酸
  •     1.2.7总糖和还原糖的测定
  •     1.2.8 qPCR检测柠檬酸发酵过程HGT1基因的表达
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 柠檬酸发酵过程中葡萄糖吸收速率的变化
  •   2.2 葡萄糖转运蛋白的进化树分析、多序列比对及跨膜预测
  •   2.3 黑曲霉HGT1转化子的柠檬酸发酵
  •   2.4 HGT1对黑曲霉在葡萄糖限制性培养基上生长的影响
  • 3 结语

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 殷娴,李江华,刘龙,堵国成,陈坚

    关键词: 高亲和力葡萄糖转运蛋白,柠檬酸,黑曲霉

    来源: 食品与生物技术学报 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院

    基金: 国家优秀青年科学基金项目（31622001）,江南大学博士研究生科学研究基金项目（JUDCF11008）,江苏省研究生创新工程资助项目（CXZZ11_0477）

    分类号: Q936

    页码: 59-65

    总页数: 7

    文件大小: 2509K

    下载量: 61

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/53a7b9c03b627cbdb5012bdd.html