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产果聚糖蔗糖酶重组枯草芽孢杆菌的构建及表达

论文摘要

果聚糖蔗糖酶能够将蔗糖和乳糖转化为具有益生元功能的低聚乳果糖。为了实现果聚糖蔗糖酶在重组枯草芽孢杆菌中的高效表达,将两种启动子比较并进行串联操作,确定生产果聚糖蔗糖酶的最佳启动子并对重组菌的生长条件进行探索。构建WB-PH、WB-P、WB-H、1A-PH、1A-P、1A-H六种重组枯草芽孢杆菌,其中WB-PH发酵酶活明显优于其他重组菌。研究生长条件对重组菌WB-PH产酶的影响,采用大豆蛋白胨作为氮源,果聚糖蔗糖酶的表达量明显增加,发酵过程中保持较高的溶氧水平也对产酶量有较大的提高。优化后的发酵酶活最高可达108.34 U/mL,相比优化前提高了25.92倍。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌种与质粒
  •     1.1.2 试剂和培养基
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 果聚糖蔗糖酶目的基因的克隆与重组质粒的构建
  •     1.2.2 重组枯草芽孢杆菌的构建
  •     1.2.3 培养与表达
  •     1.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析（SDS-PAGE）
  •     1.2.5 果聚糖蔗糖酶发酵酶活检测
  •     1.2.6 菌体量测定
  •     1.2.7 发酵条件优化
  • 2 结果与分析
  •   2.1 目的基因的克隆与重组质粒的构建
  •   2.2 重组质粒在枯草芽孢杆菌中的表达
  •   2.3 发酵条件优化结果分析
  •     2.3.1 氮源种类及用量
  •     2.3.2 碳源种类及用量
  •     2.3.3 接种量
  •     2.3.4 装液量
  •     2.3.5 发酵时间
  • 3 结语

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 孙惟沁,沐万孟,张涛,江波

    关键词: 果聚糖蔗糖酶,高效表达,基因工程菌,发酵

    来源: 食品与生物技术学报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 食品科学与技术国家重点实验室江南大学

    基金: 国家863计划项目(2013AA102102)

    分类号: Q55

    页码: 79-86

    总页数: 8

    文件大小: 3400K

    下载量: 109

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/55a0f1f6915163c97d415fa7.html