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玉米ZmGRAS31基因的克隆及功能研究

论文摘要

GRAS蛋白家族是一类植物特有的转录调控因子,在多种植物中均有报道。为了探究玉米GRAS基因家族在逆境胁迫下的功能,本研究从玉米根中克隆获得ZmGRAS31 （AC:NC024462）,该基因全长1422 bp,编码473个氨基酸。生物信息学分析表明ZmGRAS31蛋白分子量为51,700.38Da,理论等电点为4.73,具有GRAS转录因子家族特有的保守结构域,但不具跨膜结构,亲水性较差。玉米原生质体瞬时表达实验表明ZmGRAS31定位于细胞核内。实时荧光定量PCR（qPCR）分析表明,在低温、脱水、高盐、干旱处理下,ZmGRAS31在玉米幼苗均上调表达;不同浓度NaCl处理过表达ZmGRAS31转基因拟南芥植株,其根长优于野生型,由此推测该基因可能参与玉米非生物胁迫应答。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 植物材料及试剂
  •   1.2 玉米总RNA的提取及ZmGRAS31 cDNA的克隆
  •   1.3 玉米ZmGRAS31基因的亚细胞定位
  •     1.3.1 植物表达载体pYBA1132:ZmGRAS31:EGFP的构建
  •     1.3.2 玉米原生质体的提取及转化
  •   1.4 玉米ZmGRAS31基因的抗逆表达及组织差异表达——qPCR分析
  •   1.5 植物过表达载体p4301:ZmGRAS31的构建及拟南芥遗传转化
  •     1.5.1 过表达载体构建
  •     1.5.2 Gateway目的载体 （Destination Vector） 的构建
  •     1.5.3 转化农杆菌GV3101及侵染拟南芥
  •     1.5.4转基因拟南芥种子逆境处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 玉米转录因子ZmGRAS31基因序列扩增
  •   2.2 玉米原生质体中的亚细胞定位
  •   2.3 玉米ZmGRAS31基因在不同组织中的表达情况
  •   2.4 不同逆境处理对玉米幼苗ZmGRAS31基因表达的影响
  •   2.5 转ZmGRAS31基因拟南芥的耐盐性分析
  •   2.6 转ZmGRAS31基因拟南芥的耐甘露醇分析
  • 3 讨论
  • 4 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 殷龙飞,王朝阳,吴忠义,张中保,于荣

    关键词: 玉米,转录因子,原生质体,非生物胁迫

    来源: 作物学报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,农作物

    单位: 首都师范大学生命科学学院,北京市农林科学院农业生物技术研究中心/北京市农业基因资源和生物技术重点实验室

    基金: 北京市自然科学基金项目(6172007),国家自然科学基金项目(31871351),北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX20180404)资助~~

    分类号: S513;Q943.2

    页码: 1029-1037

    总页数: 9

    文件大小: 3535K

    下载量: 371

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/5a57f8bc3952c2a16e28e278.html