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重组大肠杆菌全细胞合成D-苯基乳酸

论文摘要

苯基乳酸（phenyllactic acid,PLA）是一种重要的有机酸,广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。通过构建D-乳酸脱氢酶重组大肠杆菌BL21（DE3）/p ET28a-ldh D利用全细胞催化合成D-苯基乳酸。对重组大肠杆菌的诱导及转化条件进行了优化,最终确定了最佳的诱导条件:OD600=0. 8时,添加IPTG至终浓度为0. 2 mmol/L,在25℃下诱导4 h;最佳的转化条件:pH 7. 0磷酸缓冲液,13 g/L苯丙酮酸钠,5 g/L葡萄糖,30 g/L菌体（干重）,37℃,200 r/min,转化2 h。在最优的条件下,苯基乳酸的产物浓度达到5. 2 g/L,产率为40%。该文还探索了苯丙酮酸钠与葡萄糖分批添加对苯基乳酸合成的影响,并初步得到了最佳工艺,经3 h转化,苯基乳酸产物质量浓度和产率分别提高到7. 38 g/L和52. 7%,显示了较好的应用前景,也为后续酶的改造奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 菌种
  •   1.2 材料与试剂
  •   1.3 实验设备与分析仪器
  •   1.4 实验方法
  •     1.4.1 重组大肠杆菌的培养及诱导
  •     1.4.2 诱导条件的优化
  •     1.4.3 全细胞转化条件的优化
  •     1.4.4 补料分批添加对转化的影响
  •   1.5 分析方法
  • 2 结果与分析
  •   2.1 诱导条件的优化
  •   2.2 转化条件的优化
  •     2.2.1 转化体系的优化
  •     2.2.2 菌体处理对合成苯基乳酸的影响
  •     2.2.3 补料分批添加对产量的影响
  • 3 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 鲍志伟,苏晓,杨柳婷,陈耀,罗希,付永前,孙小龙

    关键词: 苯基乳酸,重组大肠杆菌,全细胞转化,乳酸脱氢酶,苯丙酮酸钠

    来源: 食品与发酵工业 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 台州学院生物质资源研究所

    基金: 国家自然科学基金(21007044,21106091),台州市课题(1701hb01),浙江省大学生科技创新计划暨新苗人才计划(2018R436026)

    分类号: TQ921

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.017960

    页码: 49-53

    总页数: 5

    文件大小: 2236K

    下载量: 177

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/6575078cb9f18026684b059a.html