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家鸡G蛋白偶联受体85基因的结构、序列与组织表达分析

论文摘要

G蛋白偶联受体（GPCR）超家族是细胞膜上广泛存在的一类受体,是细胞跨膜信号转导的一类重要受体分子,参与许多生理过程调节。它们中仍有很多至今尚未找到内源性配体,这类受体被称为孤儿型受体。G蛋白偶联受体85（GPR85）是GPCR超家族中孤儿型受体的一员。目前,在非哺乳类脊椎动物中,针对GPR85的研究极少。本研究以家鸡Gallus gallus domesticus为模型,通过反转录PCR和RACE-PCR等方法从脑中克隆到GPR85基因的cDNA全长序列,揭示其基因结构,并用实时荧光定量PCR （qPCR）方法探究了该基因在家鸡各组织中的表达情况。结果显示:家鸡GPR85基因位于1号染色体上,由2个外显子组成,其编码区位于第2个外显子上,长为1 113 bp,可编码1个370个氨基酸的7次跨膜受体蛋白。家鸡GPR85与其他脊椎动物（人Homo sapiens、小鼠Mus musculus、大鼠Rattus norvegicus、热带爪蟾Xenopus tropicalis和斑马鱼Danio rerio）的GPR85具有高度的氨基酸序列一致性（>93%）。qPCR分析发现,GPR85基因mRNA在家鸡全脑、垂体、肾上腺、精巢中有较高表达,而在所检测的其他外周组织中表达极低。本研究首次揭示了家鸡GPR85基因的结构与表达特征,为后续探究GPR85基因在家鸡等非哺乳类中的生理功能奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 组织RNA提取
  •     1.2.2 cDNA模板制备
  •     1.2.3 引物设计
  •     1.2.4 家鸡GPR85基因编码区的克隆
  •     1.2.5 家鸡GPR85基因5'-RACE和3'-RACE
  •     1.2.6 生物信息学分析
  •     1.2.7 家鸡GPR85基因的表达特征
  • 2 结果与分析
  •   2.1 家鸡GPR85基因的克隆与序列分析
  •   2.2 家鸡GPR85基因5'-UTR和3'-UTR的鉴定
  •   2.3 家鸡GPR85基因的组织表达分析
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 宋亮,张剑南,刘海坤,莫春横,李娟,王亚军

    关键词: 家鸡,蛋白偶联受体,克隆,组织表达

    来源: 四川动物 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(31771375)

    分类号: Q78;S831

    页码: 271-278

    总页数: 8

    文件大小: 2890K

    下载量: 85

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/676a2beb7b89f54bcaa9f7e5.html