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YAP调控肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的机制分析

论文摘要

目的探讨Yse相关蛋白（Yes-associated protein,YAP）对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响及其机制。方法采用MTS检测顺铂对肺腺癌A549细胞以及肺腺癌耐顺铂A549/DDP细胞的50%抑制浓度（IC50）。使用q PCR以及Western blot检测A549和A549/DDP细胞中YAP mRNA以及蛋白的表达。Western blot检测维替泊芬（Verteporfin,VP）处理A549/DDP后YAP蛋白表达变化。将A549/DDP细胞设置为DMSO对照组、顺铂组（DDP组）、维替泊芬组（VP组）、顺铂联合维替泊芬组（DDP+VP组）,采用MTS检测0、24和48 h各处理组细胞活力的变化。采用q PCR检测VP处理A549/DDP后干细胞标志物ALDHA1、CD133、OCT4、NANOG、SOX2的mRNA表达变化。结果顺铂对A549和A549/DDP细胞的IC50分别为（4.07±0.03）μg/ml、（23.44±0.98）μg/ml,耐药指数为5.76。A549/DDP细胞中YAP显著高于A549细胞（P<0.05）。VP处理A549/DDP细胞后YAP蛋白表达水平较DMSO组明显降低。DDP+VP组较单独DDP组,其细胞活力在24 h和48 h均明显降低（P<0.05）。q PCR检测发现A549/DDP细胞经VP处理后,干细胞标志物ALDHA1、CD133、OCT4、NANOG、SOX2的mRNA均较DMSO组明显降低（P<0.05）。结论 YAP可能参与了肺癌细胞的顺铂耐药。抑制YAP可通过抑制肿瘤干细胞特性,进而发挥逆转耐药的作用。

论文目录

  • 材料与方法
  •   一、实验材料
  •   二、实验方法
  •     1．细胞培养:
  •     2. MTS实验检测顺铂对A549细胞以及A549/DDP细胞的IC50:
  •     3. MTS实验检测A549/DDP细胞在DMSO对照组、DDP处理组、VP处理组以及DDP联合VP处理组中细胞活力:
  •     4. Westem blot法检测YAP的表达:
  •     5. qPCR检测YAP以及ALDHA1、CD133、OCT4、NANOG、SOX2表达:
  •   三、统计学方法
  • 结果
  •   一、A549和A549/DDP细胞顺铂耐药性比较
  •   二、YAP在A549以及A549/DDP细胞中的表达
  •   三、VP增强A549/DDP细胞对顺铂敏感性
  •   四、VP抑制A549/DDP细胞中干细胞标志物
  • 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 肖丹,杜琴,贺斌峰,郭晓兰

    关键词: 非小细胞肺癌,维替泊芬,顺铂耐药

    来源: 中华肺部疾病杂志(电子版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 川北医学院转化医学研究中心,陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院呼吸研究所

    基金: 四川省卫计委科研课题(16PJ131)

    分类号: R734.2

    页码: 697-701

    总页数: 5

    文件大小: 1106K

    下载量: 128

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/691099c894ad91c6580cf377.html