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sRAGE通过AGEs-RAGE信号轴抑制小鼠SGCs的凋亡

论文摘要

目的探讨可溶性RAGE（soluble form of receptor for advanced glycation-end products,sRAGE）对晚期糖基化终产物（advanced glycation end products,AGEs）-晚期糖基化终产物受体（receptor for advanced glycation-end products,RAGE）介导的C57BL/6J小鼠SGCs（spiral ganglion cells,SGCs）凋亡及RAGE受体表达的影响。方法不同浓度的sRAGE作用于培养5天后的螺旋神经节细胞和加入AGEs-BSA作用2 h后的SGCs细胞,采用免疫荧光法鉴定SGCs,通过流式细胞术检测细胞凋亡,以及RT-PCR检测RAGE的mRNA的表达,琼脂糖凝胶电泳对扩增结果进行确认,同时采用western blot技术检测凋亡相关蛋白Bax、BCL-2及caspase-3的表达情况。结果原代培养获得足够数量以及活性良好的SGCs,并用小鼠抗神经微丝蛋白抗体染色以鉴定。单纯向SGCs加入不同浓度的sRAGE,细胞凋亡无明显增加,RAGE受体的表达无明显增多;而不同浓度sRAGE加入AGEs作用的SGCs后,可见SGCs的凋亡随sRAGE浓度增加而减少,呈浓度相关性,RAGE受体的mRNA表达也随之减弱。凋亡相关蛋白中,BCL-2表达升高,Bax及cleaved caspase-3表达降低。结论 s RAGE可以减少AGEs诱导的SGCs的凋亡,并减少膜上RAGE受体的表达,可能与s RAGE竞争性结合AGEs而不产生相应生物学效应有关。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 试剂与仪器
  •   1.2 细胞培养
  •   1.3 SGCs免疫荧光鉴定
  •   1.4 SGCs凋亡的流式检测
  •   1.5 Western blot技术检测SGCs凋亡相关蛋白Bax、BCL-2及caspase-3的表达情况
  •   1.6 RT-PCR分析各实验组SGCs的RAGE mRNA的表达
  • 2 结果
  •   2.1 SGCs的培养及鉴定
  •   2.2 AGEs、sRAGE对SGCs凋亡率的影响
  •   2.3 AGEs、sRAGE对SGCs凋亡相关蛋白Bax、BCL-2及caspase-3的影响
  •   2.4 RT-PCR分析各实验组SGCs的RAGE mRNA的表达情况
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吴小波,林昶

    关键词: 小鼠螺旋神经节细胞,凋亡

    来源: 中华耳科学杂志 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 眼科与耳鼻咽喉科

    单位: 福建医科大学附属第一临床医学院,福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科

    基金: 福建省科技合作重点项目2014I0003~~

    分类号: R764.436

    页码: 958-962

    总页数: 5

    文件大小: 1334K

    下载量: 89

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/6b5190fbcec37ca7b1595ba6.html