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粳型恢复系C418转基因再生体系的建立

论文摘要

为水稻转基因育种和突变体库的建立创造有利条件,以粳稻C418成熟胚为外植体,通过植物组织培养技术,考察不同基础培养基（N6、MS、MSN、NMB、NB、MB和NBD）和生长素2,4-D浓度（1mg/L、2mg/L和3mg/L）对外植体愈伤组织诱导效果;将继代培养获得的优良愈伤组织采用农杆菌介导法进行遗传转化,并考察适宜的共培养时间以及不同抗生素（头孢霉素、氨苄霉素和m潮霉素）对愈伤组织的分化效果,以建立北方骨干粳型恢复系C418转基因再生体系。结果表明:在愈伤组织诱导过程中,基础培养基NBD+3mg/L 2,4-D处理粳稻C418成熟胚愈伤组织诱导率最高,达90.38%,愈伤组织生长状态最佳;水稻愈伤组织共培养2d获得的抗性愈伤组织最多,筛选培养基中降低头孢霉素浓度并添加氨苄霉素可提高水稻愈伤组织分化率。通过培养基类型、激素浓度、共培养时间及抗生素种类的最佳组合,成功建立北方骨干粳型恢复系C418转基因再生体系,即水稻外植体经次氯酸钠处理后接种于诱导培养基NBD+3mg/L 2,4-D,获得愈伤组织,再用农杆菌悬浮液（含目的基因）侵染愈伤组织,最后获得含目的基因的转基因植株。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •     1.1.1 水稻材料
  •     1.1.2 试剂及菌株
  •     1.1.3 培养基
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 外植体灭菌处理
  •     1.2.2成熟胚愈伤组织的诱导
  •     1.2.3 水稻愈伤组织的继代
  •     1.2.4 水稻愈伤组织的转化
  •     1.2.5 相关指标计算
  •     1.2.6 数据统计分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 次氯酸钠浓度对外植体污染率的影响
  •   2.2 培养基与2,4-D浓度对水稻愈伤诱导的影响
  •     2.2.1 培养基单因素影响
  •     2.2.2 2,4-D浓度单因素影响
  •     2.2.3培养基与2,4-D浓度互作影响
  •   2.3 农杆菌介导的水稻愈伤组织转化效果
  •   2.4 抗性愈伤分化效果
  • 3 结论与讨论
  •   3.1 诱导培养基及其生长素2,4-D浓度的选择
  •   3.2 水稻愈伤组织转化和分化条件的优化
  •   3.3 建立粳型恢复系C418转基因再生体系

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张晓磊,韦永贵,董卓娅,孙宏伟,罗龙

    关键词: 水稻,再生体系,培养基,诱导率

    来源: 贵州农业科学 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 农作物

    单位: 文山州农业科学院

    基金: 云南省科技人才和平台计划项目(2018HB115)

    分类号: S511.22

    页码: 4-7

    总页数: 4

    文件大小: 590K

    下载量: 30

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/76e9f09623505611f781cbf1.html