【目的】克隆水稻TFL2（OsTFL2）启动子序列,并分析其结构和功能,为深入研究OsTFL2基因对水稻开花和花发育的调控机理提供理论参考。【方法】采用同源克隆方法克隆OsTFL2基因启动子序列,利用PLACE和PlantCARE分析其结构和功能,并将其连接至携带β-葡萄糖苷酸酶（GUS）基因的pCAMBIA1301载体以构建pCAMBIA1301-Promoter植物表达载体,通过农杆菌介导转化水稻品种农垦58愈伤组织,通过对转基因植株进行GUS组织化学染色以分析该基因启动子的表达特性和调控功能。【结果】克隆获得的OsTFL2基因起始密码子上游启动子序列1.8 kb,该序列除含有真核生物典型启动子元件TATA-box和CAAT-box外,还含有花粉特异识别的顺式作用元件Pollen1lelat52（AGAAA）、开花基因转录相关的多功能转录因子CACTFTPPCA1（PACT,Y=C/T）、CCAAT box1（CCAAT）、DOFCORE（AAAG）和GATA box（GATA）、分生组织特异性元件CCGTCC-box及多个光诱导元件或光诱导相关元件如G-box、Box I、CATT-motif、GATA-motif和GT1-motif等,推测OsTFL2基因通过上述作用元件参与调控水稻花发育及开花。通过PCR检测共筛选获得16株阳性转基因植株,对其进行GUS组织化学染色,结果发现水稻的外颖、花、花药、柱头和子房中均可检测到明显的GUS色斑,而在叶片、茎尖和根尖无明显的GUS色斑,说明OsTFL2启动子能驱动GUS基因在水稻外颖、花药和子房中表达。【结论】OsTFL2基因启动子具有启动活性和组织表达特异性,可在一定程度上影响OsTFL2基因表达,对水稻花生长发育和开花发挥重要调控作用。
类型: 期刊论文
作者: 陈立,张晓东,王心怡,韦清源,李虎,綦熿松,刘芳,关和新,邱永福
关键词: 水稻,开花,基因,启动子,转基因,染色
来源: 南方农业学报 2019年10期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,农作物
单位: 广西大学农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西农业科学院经济作物研究所
基金: 国家自然科学基金项目（31560423）,广西自然科学基金项目（2013GXNSFGA019009,2018GXNSFBA281210）
分类号: S511;Q943.2
页码: 2188-2195
总页数: 8
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本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/78589d07e063c2826d8763be.html