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基于mTORC1/4EBP1信号通路探讨银盏心脉滴丸对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞线粒体功能的影响

论文摘要

目的观察银盏心脉滴丸对大鼠心肌细胞（H9C2）mTORC1/4EBP1信号通路的影响以探讨其对线粒体功能的机制。方法制备银盏心脉滴丸含药血清。将细胞分为对照组、模型组（缺氧/复氧）、空白血清组及银盏心脉滴丸含药血清组。制备缺氧/复氧细胞损伤模型,利用激光共聚焦检测线粒体膜电位（ΔΨm）,利用流式细胞仪检测活性氧（reactive oxygen species, ROS）,运用Western Blot技术检测细胞雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR）、真核翻译起始因子4E结合蛋白（eukaryotic translation initiation factor 4E-binding proteins,4E-BP）、mTOR复合体蛋白（regulatory-associated protein of mammalian target of rapamycin,Raptor）蛋白表达,运用q-PCR方法检测mTORC1、4EBP1、Raptor的mRNA含量。结果与对照组相比,模型组细胞内绿色荧光增强,ΔΨm显著高于对照组（P<0.05）;而与模型组相比,银盏心脉滴丸组红色荧光增强（P<0.05）,说明银盏心脉保护ΔΨm稳定,保护线粒体膜结构;与对照组相比,模型组的ROS合成较对照组升高（P<0.05）;而与模型组相比,银盏心脉滴丸组细胞内ROS产生明显降低（P<0.05）;与对照组相比,模型组mTOR、Raptor基因mRNA水平下调（P<0.05）,4ebp1基因mRNA水平上调,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,银盏心脉滴丸组mTOR、Raptor基因mRNA水平上调（P<0.05）,4ebp1基因mRNA水平下调（P<0.05）。结论银盏心脉滴丸改善缺氧复氧损伤的机制可能是通过激活mTORC1/4EBP1信号通路,从而抑制线粒体膜电位,改善活性氧,保护线粒体功能。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验设备及药物
  •   1.2 细胞
  •   1.3 含药血清的制备
  •   1.4 分组及缺氧/复氧心肌细胞模型的制备
  •   1.5 激光共聚焦检测心肌细胞线粒体膜电位
  •   1.6 细胞仪检测ROS含量
  •   1.7 Western Blot检测各组细胞相关蛋白表达
  •   1.8 Q-PCR检测各组细胞mRNA表达
  •   1.9 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 银盏心脉滴丸对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响
  •   2.2 银盏心脉滴丸对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞ROS生成量的影响
  •   2.3 银盏心脉滴丸对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞mTOR、Raptor、4ebp1蛋白表达的影响
  •   2.4 银盏心脉滴丸对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞mTOR、Raptor、4ebp1基因mRNA表达的影响
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李洁,刘如秀

    关键词: 银盏心脉滴丸,缺氧,复氧,信号通路,膜电位,活性氧

    来源: 环球中医药 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 中国中医科学院广安门医院心血管科

    分类号: R285.5

    页码: 1805-1810

    总页数: 6

    文件大小: 1163K

    下载量: 169

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/79e68e4731f9d66e92c397a4.html