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α芋螺毒素MI分支肽的合成及免疫原性研究

论文摘要

目的:为探索α芋螺毒素MI的解毒方法,研究MI分支肽抗原的合成方法、免疫原性及抗血清对MI的解毒活性。方法:采用固相多肽合成法合成含炔基MI线性肽及含叠氮赖氨酸分支肽,空气氧化得含炔基MI,通过铜[Cu（Ⅰ）]催化叠氮-炔杂环加成反应合成多分支肽。多分支肽4次免疫BALB/c小鼠制备抗血清,ELISA法测定血清抗体滴度,然后MI与抗血清混合注射KM小鼠,测定抗血清的保护效果。结果:合成了MI八分支肽,N端连接的MI八分支肽的免疫原性差,10、20μg/只剂量组第4次免疫后的血清抗体滴度分别为1∶400及1∶6400;C端连接的MI八分支肽的免疫原性较高,10、20μg/只剂量组第4次免疫后的血清抗体滴度分别为1∶3200及1∶25 600。各组200μL抗血清与20μg/kg MI混合后注射小鼠,小鼠均死亡,且死亡时间与对照组相比无显著差异。结论:C端连接的MI八分支肽比N端连接的八分肽免疫抗原性高,但两者的抗血清对MI无显著解毒活性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 Fmoc-Lys（butynyl）-OH合成
  •   1.3 MI多分支抗原的合成
  •     1.3.1 含炔基MI线性肽及含叠氮的赖氨酸多分支肽的合成
  •     1.3.2 含炔基MI线性肽的氧化折叠及纯化
  •     1.3.3 赖氨酸多分支肽的纯化
  •     1.3.4 含炔基MI与D的CuAAc反应（click反应）
  •   1.4 含炔基MI腹腔注射毒性
  •   1.5 小鼠免疫
  •   1.6 MI八分支肽抗血清滴度测定
  •   1.7 中和活性实验
  • 2 结果
  •   2.1 含炔基MI的合成
  •   2.2 MI多分支肽的合成结果
  •   2.3 含炔基MI小鼠腹腔注射毒性
  •   2.4 MI八分支抗原的抗体滴度
  •   2.5 抗血清的中和活性
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈荣芳,余硕,周良燚,张学荣,戴秋云

    关键词: 芋螺毒素,八分支肽,铜催化叠氮炔杂环加成反应,抗血清,中和活性

    来源: 生物技术通讯 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 基础医学

    单位: 广西医科大学蛇毒研究所广西医科大学基础医学院,军事医学研究院生物工程研究所

    基金: 国家重点研发计划（2019YFC03036405）

    分类号: R392

    页码: 768-774

    总页数: 7

    文件大小: 1903K

    下载量: 63

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/83ea7e9db4b736cba34c1703.html