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DNA-Lipid探针用于细胞膜外pH值的原位成像

论文摘要

将二酰基脂质体自动偶联到两端标有Cy3和Cy5的具有i-motif结构的DNA链上,形成二酰基脂质体-DNA共轭物（DNA-lipid）探针。二酰基脂质体与细胞膜之间强烈的疏水作用可使该探针直接插入细胞膜表面,实现缺氧和常氧条件下细胞外pH值的比率型检测。在高pH值条件下,具有i-motif结构的DNA链两端的荧光基团处于分离状态,无FRET效应;在低pH值条件下,具有i-motif结构的DNA链在细胞膜表面形成四聚体结构,两端的荧光基团相互靠近,产生强的FRET效应。通过测定两种荧光基团的荧光强度比值实现了pH值的定量检测。利用此探针对pH值的灵敏响应实现了对缺氧环境中细胞外pH值的精确测量,在生理病理学上具有重大意义。

论文目录

  • 1 实验部分
  •   1.1 仪器与试剂
  •   1.2 溶液的配制
  •   1.3 探针的制备与表征
  •     1.3.1 探针的制备
  •     1.3.2 细胞培养及细胞膜修饰
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 检测原理
  •   2.2 探针序列体外筛选及表征
  •     2.2.1 序列优化
  •     2.2.2 序列表征
  •   2.3 细胞膜表面传感器的构建及表征
  •   2.4 体外标准工作曲线的绘制
  •   2.5 细胞标准工作曲线
  •   2.6 不同氧气浓度环境下的细胞膜外p H值原位成像分析
  • 3 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 周文玉,汤娉婷,杨荣华,郑晶

    关键词: 缺氧环境,细胞外值,结构,二酰基脂质体,荧光共振能量转移,成像分析

    来源: 分析测试学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,化学

    单位: 邵阳市环境保护监测站,湖南大学化学化工学院,长沙理工大学化学与生物工程学院

    分类号: O657.3;Q2-33

    页码: 154-158

    总页数: 5

    文件大小: 1093K

    下载量: 64

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/8fef5911da4792f7447d83ba.html