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拟南芥MYB4基因GUS载体构建及其转基因植株的筛选

论文摘要

[目的]进一步验证MYB4基因在响应干旱胁迫中的应答功能,构建ProMYB4:GUS载体,通过筛选鉴定获得相应的转基因植株。[方法]以野生型拟南芥植株的全基因组为模板,利用特异性引物扩增MYB4基因启动子,将目的基因连接到pART27载体上。然后将构建成功的重组载体转化至农杆菌GV3101,浸花法转化野生型植株。最后通过抗性筛选和PCR鉴定获得阳性转基因植株。[结果]MYB4启动子成功克隆,测序结果经过比对完全正确。抗性筛选获得了阳性转基因植株。[结论]成功获得ProMYB4:GUS阳性转基因植株,为进一步研究MYB4基因功能奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 材料。
  •     1.1.2 主要试剂及酶类。
  •     1.1.3 菌体和质粒载体。
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 拟南芥全基因组DNA的提取。
  •     1.2.2 MYB4基因启动子扩增。
  •     1.2.3 重组质粒的获取。
  •     1.2.4 转基因植株的筛选。
  • 2 结果与分析
  •   2.1 拟南芥MYB4基因启动子的克隆
  •   2.2 目的基因与质粒双酶切
  •   2.3 阳性重组质粒的PCR鉴定
  •   2.4 阳性植株的筛选
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 欧阳剑,吴席,徐杰娜,樊婷婷

    关键词: 拟南芥,基因,启动子,转基因植株

    来源: 安徽农业科学 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 合肥工业大学食品与生物工程学院

    基金: 中央高校基本科研业务费专项(JZ2018HGTB0248)

    分类号: Q943.2

    页码: 82-83+162

    总页数: 3

    文件大小: 509K

    下载量: 845

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/a1337e32a62d538ddf10d6de.html