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miRNA-451通过MRP靶向调控胃癌细胞对5-Fu耐药性的机制研究

论文摘要

目的探讨miR-451通过下调耐药基因MRP表达,调控胃癌对5-Fu耐药的相关机制。方法采用实时荧光定量PCR检测20对人胃癌组织及癌旁组织和胃癌细胞系中miR-451的相对表达量,根据患者对药物的反应进行分组并检测耐药组以及非耐药组miR-451的表达水平。构建plent-miR-451稳定过表达胃癌细胞系,通过荧光实时定量PCR检测胃癌细胞系miR-451过表达效率,CCK8法检测不同浓度5-Fu对细胞增殖活力的影响。生物信息学方法分析miR-451的靶基因,并通过荧光素酶实验验证。实时定量PCR以及Western blot检测miR-451对靶基因MRP mRNA和蛋白水平的影响。结果 miR-451在正常组织中表达量高于胃癌组织,在非耐药胃癌组织中高于耐药胃癌组织。过表达miR-451降低了胃癌细胞对5-Fu的耐受能力（P=0.0006）。生物信息学分析显示MRP为miR-451的靶基因,荧光素酶实验同时也证实MRP为miR-451的潜在靶基因。过表达miR-451可导致耐药基因MRP mRNA以及蛋白水平均显著降低（P=0.00069）。结论过表达mi R-451可下调耐药基因MRP表达,使肿瘤细胞对5-Fu耐药性降低。

论文目录

  • 0 引言
  • 1 资料与方法
  •   1.1 资料
  •   1.2 组织来源
  •   1.3 细胞培养
  •   1.4 病毒包装
  •   1.5 构建稳定过表达细胞系
  •   1.6 细胞转染
  •   1.7 RNA提取及荧光定量
  •   1.8 Western blot检测MRP的表达
  •   1.9 荧光素酶实验
  •   1.1 0 CCK8检测细胞活力
  •   1.1 1 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 mi R-451在不同胃癌组织及胃癌细胞系中的表达
  •   2.2 miR-451过表达抑制胃癌细胞增殖且降低胃癌细胞对5-Fu的耐药性
  •   2.3 MiR-451对MRP表达的调节作用
  •   2.4 miR-451调控MRP的表达
  •   2.5 过表达MRP可促进耐药细胞系对5-Fu的耐药性
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 高红艳,郭洁,吴方雄,刘锋瑞,王丽

    关键词: 胃癌,耐药性,基因

    来源: 肿瘤防治研究 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 西安医学院第一附属医院消化内科,西安医学院第一附属医院急诊科

    分类号: R735.2

    页码: 1073-1077

    总页数: 5

    文件大小: 2257K

    下载量: 113

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/a616c0a724bc9bfdcb54645f.html