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lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为

论文摘要

目的:探讨lncRNA XIST通过miR-32-5p/果蝇Zeste基因增强子同源物2（enhancer of zeste homolog2,EZH2）分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为。方法:收集2014年7月至2018年8月中南大学湘雅医院直肠肛门外科资料完整的结直肠癌患者28例癌组织和配对的癌旁组织标本,采用qPCR检测结直肠癌组织及细胞系中lncRNA XIST和miR-32-5p的表达水平,双荧光素酶报告基因验证1ncRNA XIST、miR-32-5p和EZH2的靶向关系,并进一步通过WB检测EZH2的表达水平。CCK-8、Transwell及Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测HCT-8细胞增殖、迁移及凋亡情况。结果:lncRNA XIST在结直肠癌组织及细胞系中高表达,且在HCT-8细胞中表达最高（P<0.05或P<0.01）。双荧光素酶报告基因证实,lncRNA XIST靶向负调控miR-32-5p（P<0.05）,且EZH2是miR-32-5p的靶基因。敲降1ncRNA XIST抑制HCT-8细胞增殖和迁移并诱导其凋亡（P<0.05或P<0.01）;进一步实验证明,敲降lncRNA XIST上调miR-32-5p的表达水平,从而下调EZH2表达水平,进而抑制HCT-8细胞增殖和迁移并诱导其凋亡。结论:lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴促进HCT-8细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡。

论文目录

  • 1 资料与方法
  •   1.1 临床样本、细胞株和主要试剂及仪器
  •   1.2 细胞培养
  •   1.3 细胞转染
  •   1.4 qPCR检测结直肠癌组织及细胞系中lncRNA XIST和miR-32-5p的表达水平
  •   1.5 WB检测HCT-8细胞中EZH2蛋白的表达水平
  •   1.6 双荧光素酶验证lncRNA XIST、miR-32-5p和EZH2的靶向关系
  •   1.7 CCK-8检测HCT-8细胞的增殖能力
  •   1.8 Transwell检测HCT-8细胞的迁移能力
  •   1.9 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测HCT-8细胞凋亡水平
  •   1.1 0 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 lncRNA XIST在结直肠癌组织及细胞系中的表达及其与患者病理特征的关系
  •   2.2 敲降lncRNA XIST可抑制HCT-8细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡
  •   2.3 lncRNA XIST靶向结合miR-32-5p
  •   2.4 过表达miR-32-5p抑制HCT-8细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡
  •   2.5 miR-32-5p靶向结合EZH2
  •   2.6 lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴促进HCT-8细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吴瑞平,陈冠阳,陈志康

    关键词: 结直肠癌,果蝇基因增强子同源物,增殖,迁移,凋亡

    来源: 中国肿瘤生物治疗杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 中南大学湘雅医院直肠肛门外科

    分类号: R735.34

    页码: 1363-1370

    总页数: 8

    文件大小: 2157K

    下载量: 124

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/a8355c050e1fc0f42a367a88.html