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降香新黄酮latifolin通过Nrf2/HO-1通路抗H9c2细胞缺氧复氧损伤作用研究

论文摘要

目的:研究降香新黄酮latifolin对心肌H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其可能机制。方法:建立H9c2细胞缺氧复氧损伤模型,实验分正常对照组、模型组及不同浓度latifolin（2.5、5、10、20μg/mL）组;采用MTT法检测细胞活力,微量酶标法测定细胞上清LDH活性;荧光染色法和流式细胞仪分析细胞中ROS含量;免疫荧光染色法和Western blot检测胞浆中Nrf2、HO-1及胞核中Nrf2蛋白表达。结果:与模型组比较,latifolin能显著升高H9c2细胞活力,降低细胞上清中LDH及细胞中ROS水平,升高胞浆中Nrf2、HO-1及胞核中Nrf2蛋白表达（P<0.05）。结论:latifolin对H9c2细胞缺氧复氧所致损伤具有保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

论文目录

  • 1 材料与仪器
  •   1.1 细胞株
  •   1.2 药物与试剂
  •   1.3 主要仪器
  • 2 方法
  •   2.1 H9c2细胞的培养
  •   2.2 缺氧复氧损伤模型制备
  •   2.3 实验分组及药物处理
  •   2.4 指标检测
  •     2.4.1 MTT法测定细胞活力:
  •     2.4.2 微量酶标法测定细胞上清LDH活性:
  •     2.4.3 荧光染色法测定细胞中ROS含量:
  •     2.4.4 流式细胞仪测定细胞中ROS荧光强度:
  •     2.4.5 免疫荧光染色法测定细胞中Nrf2含量:
  •     2.4.6 Western blot 检测目的蛋白表达:
  •   2.5 统计学处理
  • 3 结果
  •   3.1 latifolin对缺氧复氧损伤H9c2细胞活力的影响
  •   3.2 latifolin对缺氧复氧损伤H9c2细胞上清液中LDH水平的影响
  •   3.3 latifolin对缺氧复氧损伤H9c2细胞中ROS的影响
  •     3.3.1 荧光染色法检测latifolin对缺氧复氧损伤 H9c2 细胞中ROS的影响:
  •     3.3.2 流式细胞仪检测latifolin对缺氧复氧损伤 H9c2 细胞中ROS的影响:
  •   3.4 latifolin对缺氧复氧损伤H9c2细胞中Nrf2表达和分布的影响
  •   3.5 latifolin对缺氧复氧损伤H9c2细胞胞浆中Nrf2、HO-1蛋白及胞核中Nrf2蛋白表达的影响
  • 4 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张妮,陈兰英,骆瑶,罗颖颖,崔亚茹,刘荣华

    关键词: 降香,新黄酮,氧化应激,缺氧复氧,通路

    来源: 中药材 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 江西中医药大学国家工程研究中心,江西中医药大学药学院

    基金: 国家重点研发计划(2018YFC1706102),国家自然科学基金(81660676,81360629),江西省自然科学基金(20171BAB205096)

    分类号: R285.5

    DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2019.07.035

    页码: 1629-1634

    总页数: 6

    文件大小: 2570K

    下载量: 290

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/a9894c65bd2f3a63b9d16779.html