Print

LsrK激酶活力测定反应体系的优化及其稳定性研究

论文摘要

对群体感应淬灭酶LsrK的活力测定反应体系进行优化,测定LsrK的激酶活力和稳定性。以信号分子AI-2为底物,对反应体系中ATP浓度、发光波长和LsrK激酶浓度进行优化,利用Kinase-Glo发光试剂盒测定激酶活力,并在优化反应体系下测定LsrK激酶活力的稳定性。确定反应体系中ATP浓度为3μM,LsrK激酶浓度为15μM,发光波长为560nm;LsrK在30℃条件下,随时间延长,激酶活力逐渐降低,12h时酶活力基本完全消失。为进一步进行LsrK蛋白的功能研究及酶制剂的制备奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 LsrK纯化蛋白
  •     1.1.2 主要试剂及仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 AI-2的制备及浓度测定
  •     1.2.2 激酶活力测定体系的优化及ATP标准曲线测定
  •     1.2.3 LsrK激酶活力测定
  •     1.2.4 LsrK激酶活力的稳定性测定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 AI-2制备及浓度测定
  •   2.2 激酶活力测定体系的优化及ATP标准曲线测定
  •     2.2.1 ATP浓度及发光波长的优化
  •     2.2.2 ATP发光标准曲线的测定
  •   2.3 激酶活力测定
  •   2.4 激酶活力稳定性测定
  • 3 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨国栋,李志超,王骏,尹立雪,昂萨尔·江阿拜,张晓庆,赵晶

    关键词: 群体感应淬灭酶,激酶活力,稳定性

    来源: 轻工科技 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 大连民族大学生命科学学院大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室,大连工业大学生物工程学院

    基金: 大连民族大学2018年大学生创新创业训练计划项目(201812026013)

    分类号: Q55

    页码: 18-19+32

    总页数: 3

    文件大小: 2300K

    下载量: 48

    相关论文文献

    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/ad300755c8425c4ab611342d.html