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小反刍兽疫病毒感染对山羊外周血单核细胞源外泌体分泌水平的影响

论文摘要

提取小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus,PPRV）疫苗毒N75-1株感染以及未感染对照山羊外周血单个核细胞（PBMCs）源外泌体,通过纳米颗粒示踪分析技术（NTA）测定提取外泌体粒径和分布范围,并通过Western blot技术和流式细胞术检测外泌体表面标志物CD63和CD81的表达水平;然后将PPRV感染PBMCs源外泌体与正常山羊PBMCs共培养,同时设定正常山羊PBMCs源外泌体共培养组以及PBMCs培养对照组,通过荧光定量PCR法和Western blot技术检测以上各组受体细胞中PPRV特异性受体淋巴信号活化分子（SLAM）表达水平变化。结果显示,PPRV感染及对照山羊PBMCs中外泌体粒径主要分布在100 nm,且感染组外泌体（Exo-PPRV）分泌水平较正常对照组（Exo-Mock）显著升高（P<0.05）;Exo-PPRV共培养组SLAM mRNA和蛋白质表达水平较Exo-Mock组显著上调（P<0.05）,Exo-Mock组与PBMCs培养对照组间SLAM mRNA和蛋白质表达水平差异不显著。结果表明,PPRV感染能够诱导山羊PBMCs中外泌体分泌水平升高且该外泌体对未感染PBMCs中PPRV受体SLAM的表达水平具有显著的正调控作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 病毒及细胞
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 病毒感染
  •   1.4 PBMCs源外泌体的提取
  •   1.5 PBMCs源外泌体的特性分析
  •   1.6 PBMCs源外泌体对山羊PBMCs中SLAM受体表达的影响
  •   1.7 数据处理与统计
  • 2 结果
  •   2.1 PPRV在山羊PBMCs中的增殖规律
  •   2.2 PPRV感染对山羊PBMCs外泌体分泌水平影响
  •   2.3 qRT-PCR检测外泌体对受体细胞中SLAM mRNA表达的影响
  •   2.4 Western blot检测外泌体对受体细胞中SLAM蛋白质表达水平的影响
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 曾巍,万阳丽,关照,王家龙,高楚茜,王晶钰,齐雪峰

    关键词: 小反刍兽疫病毒,山羊,外泌体,淋巴细胞信号活化分子

    来源: 中国兽医学报 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 西北农林科技大学动物医学院

    基金: 国家自然科学基金资助项目(31572588),西北农林科技大学大学生创新训练项目(2201810712001,2201810712112)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.09.10

    页码: 1715-1720+1727

    总页数: 7

    文件大小: 13627K

    下载量: 105

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/b693d56e2f5593f0bd1cc975.html