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应用qRT-PCR方法检测鼠痘病毒在小鼠不同组织中的差异分布

论文摘要

鼠痘（mouse pox）是由鼠痘病毒（Ectromelia virus,ECTV）感染实验小鼠引起的一种毁灭性、烈性传染病,为SPF小鼠必须排除的病原之一。本研究基于ECTV主要核蛋白P4b基因片段建立了实时定量PCR方法（real-time quantitative PCR,qRTPCR）,用于检测C57BL/6小鼠感染ECTV后心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤中的病毒载量,并用病理组织学观察验证了qRT-PCR方法的特异性和可靠性。结果表明,所建立的qRT-PCR方法能够准确检测小鼠感染后d5和d7不同组织的病毒载量,d5不同组织中病毒载量低于d7,与病理组织学检测结果一致。本研究建立的qRT-PCR检测方法且具有较高的灵敏性、特异性和可靠性,可用于ECTV感染细胞和组织器官中病毒载量、分布和消长动态的定性定量检测。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 毒株和试验动物
  •   1.2 试剂
  •   1.3 引物的合成与标准品的制备
  •   1.4 引物特异性、敏感性及可靠性分析
  •   1.5 感染小鼠组织的采集及病毒DNA的提取
  •   1.6 qRT-PCR方法的建立及其标准曲线
  •   1.7 qRT-PCR检测感染小鼠组织中ECTV载量
  •   1.8 感染小鼠病理组织切片的观察分析
  • 2 结果
  •   2.1 ECTV qRT-PCR检测方法的建立
  •     2.1.1 ECTV qRT-PCR检测标准曲线的建立
  •     2.1.2重复性试验
  •   2.2 小鼠不同组织病毒分布的含量检测
  •     2.2.1 肝脏和脾脏病理变化的观察结果分别于感染后
  •     2.2.2 ECTV感染小鼠的组织病毒载量检测与分析
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张君,成温玉,贾怀杰,牛贤云,程国锋,景志忠

    关键词: 鼠痘病毒,实时定量,定量检测,分布

    来源: 中国动物传染病学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院上海兽医研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

    基金: “十三五”国家重点研发计划(2016YFD0500907),中央公益性院所基本科研业务费资助(1610312016019)

    分类号: S852.65

    页码: 13-18

    总页数: 6

    文件大小: 1620K

    下载量: 173

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/b6e67ca419c88e28b7fd3279.html