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‘马身猪’皮下前体脂肪细胞的分离培养及成脂诱导分化研究

论文摘要

旨在建立‘马身猪’皮下前体脂肪细胞的体外培养体系,探讨其分化过程中脂质合成及代谢相关基因的表达。对8日龄仔猪的颈部皮下脂肪组织进行采样,用Ⅰ型胶原酶进行消化,分离出原代前体脂肪细胞,进行传代和诱导分化;在此过程中观察细胞的形态、绘制细胞的生长曲线,对诱导后的细胞进行油红O染色,并采用qRTPCR法检测脂肪沉积相关基因PPARγ、LPL、FABP4、FABP3和脂肪代谢相关基因ATGL与HSL的mRNA表达变化规律。结果显示,分离出的细胞形态呈不规则梭形,生长曲线呈S型,诱导15d后在细胞内有大脂滴融合,经油红O染色呈红色;PPARγ、LPL、FABP4、FABP3和HSL基因在诱导2d时表达量达到最高,极显著高于其他时间段(P <0.01),随后降低,到诱导10d时表达量与0d时基本无差异(P>0.05)。ATGL基因表达量在诱导2d时与对照组0d相比无差异(P>0.05),诱导4d后极显著降低(P <0.01),诱导8d时表达量最低。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 试验动物和脂肪组织采集
  •     1.1.2 主要试剂和耗材
  •     1.1.3 主要仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 猪皮下前体脂肪细胞的原代培养
  •   1.3 前体脂肪细胞的传代培养
  •   1.4 细胞生长曲线的绘制
  •   1.5 前体脂肪细胞的诱导分化
  •   1.6 油红O染色及其细胞内脂肪含量的测定
  •   1.7 相关基因的表达检测
  •   1.8 数据分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 前体脂肪细胞原代培养
  •   2.2 传代培养
  •   2.3 生长曲线的绘制
  •   2.4 诱导分化及油红O染色
  •   2.5 脂肪细胞内脂肪含量测定
  •   2.6 相关基因表达检测
  • 3 讨论
  • 4 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘敏,张雪莲,张万锋,何志强,黑伟,蔡春波,高鹏飞,曹果清,李步高,郭晓红

    关键词: 马身猪,皮下前体脂肪细胞,诱导分化,基因表达

    来源: 新疆农业大学学报 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 畜牧与动物医学

    单位: 山西农业大学动物科技学院

    基金: 三晋学者支持计划专项经费资助(2016,2017),山西省“1331工程”项目(2017),国家自然科学基金项目(31872336),山西省农业重点研发项目(201803D221022-1)

    分类号: S828

    页码: 175-181

    总页数: 7

    文件大小: 3846K

    下载量: 39

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/c74fbe003abe920d4ce52850.html