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塞内卡病毒A的RT-PCR检测方法的建立和应用

论文摘要

塞内卡病毒A（Senecavirus A,SVA）是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,可引起成年母猪水疱性病变,并导致新生仔猪死亡。为建立SVA的快速检测方法,本研究对NCBI发表的40株SVA的基因序列进行同源比较,选择保守区域设计了3对引物P1、P2和P3,从中筛选出最佳扩增引物,通过对引物浓度、退火温度、延长时间、循环次数进行优化,成功建立了SVA的RT-PCR检测方法。用该方法检测SVA、脑心肌炎病毒（EMCV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）无交叉反应,具有良好的特异性。敏感性试验结果显示,病毒检测限可达1 TCID50,比国外文献报道的检测方法灵敏性更高。用该方法检测山东省的100份猪组织样品,阳性率为2%。本研究所建立的方法特异性强、敏感性高、可靠性好,为SVA的快速检测及流行病学调查提供了有效的技术手段。

论文目录

  • 1 材料与方法
  • 2 结 果
  •   2.1 特异性扩增引物的选择
  •   2.2 PCR反应条件优化
  •     2.2.1 引物浓度优化
  •     2.2.2 退火温度优化
  •     2.2.3 延长时间优化
  •     2.2.4 循环次数优化
  •   2.3 重复性检验
  •   2.4 三种RT-PCR方法的比较
  •     2.4.1 检测敏感性比较
  •     2.4.2 检测符合率
  •   2.5 临床样品检测
  • 3 讨 论
  • 4 结 论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 范慧,李亮,姜平,王先炜,李玉峰,白娟

    关键词: 塞内卡病毒,检测

    来源: 畜牧兽医学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

    基金: 国家自然科学基金(31502082),中央高校基本科研业务费专项(Y0201800849,KJQN201616)

    分类号: S852.65

    页码: 1312-1318

    总页数: 7

    文件大小: 776K

    下载量: 224

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/c87cc575cd6244798e439910.html